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目的探讨阿帕替尼（Apatinib）抑制乳腺癌细胞增殖、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期及激活细胞自噬等功能;建立阿帕替尼药物作用靶点VEGFR-2与Erk1/2信号通路的关系;研究阿帕替尼调控Erk1/2信号通路及激活自噬而诱导乳腺癌细胞凋亡的分子机制。方法本研究通过体外培养乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7,采用CCK-8法检测细胞增殖率;细胞划痕-愈合实验检测24、48、72h各组细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;激光共聚焦显微镜观察细胞双荧光mRFP-eGFP-LC3质粒转染乳腺癌细胞检测自噬发生情况;利用String数据库构建并分析阿帕替尼作用靶点VEGFR-2与MAPK之间蛋白质互相作用网络;Western Blot法检测凋亡（PARP1、Cleaved-PAPR1、Cleaved-Caspase3、Bcl-2、Bax）、自噬（LC3、P62、Beclin1）及信号通路p-Erk1/2-Erk1/2相关蛋白表达。结果1.CCK-8实验结果显示:不同浓度阿帕替尼在乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7的24h、48h、72h,450nm处吸光度,计算不同药物浓度组细胞增殖率,乳腺癌细胞增殖率与阿帕替尼浓度呈反比,且存在时间依赖性,差异有统计学意义（P均<0.001）。2.细胞划痕实验结果显示:实验组MDA-MB-231细胞在24h、48h、72h的划痕愈合比分别为（3.1±0.4）%、（8.8±1.7）%、（33.8±2.5）%,均低于空白组（P均<0.001）;实验组MCF-7细胞在24h、48h的划痕愈合比分别为（15.04±3.07）%、（24.62±5.17）%,均低于空白组（P均<0.001）。3.流式细胞仪检测细胞凋亡、Western blot检测凋亡相关蛋白结果显示:与空白组相比,阿帕替尼浓度增加,MDA-MB-231细胞、MCF-7细胞凋亡率均升高（P均<0.001）,Cleaved-PARP1、Cleaved-Caspase3等凋亡蛋白相对表达量均减少（P均<0.001）。4.流式细胞仪检测细胞周期结果显示:与空白组相比,阿帕替尼阻滞MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞于G0/G1期（P均<0.05）。5.双荧光mRFP-eGFP-LC3质粒转染乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞,通过激光共聚焦显微镜观察:阿帕替尼可以激活乳腺癌细胞自噬的发生;Western blot检测自噬相关蛋白结果显示:与空白组相比,MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞,阿帕替尼浓度增加,LC3II/LC3I、P62蛋白相对表达量呈浓度依赖性增加（P均<0.001）,Beclin1蛋白相对表达量呈浓度依赖性减少（P均<0.001）。6.自噬抑制剂3-Methyladenine（3MA 10m M）处理乳腺癌细胞8小时后更换完全培养基或者Apatinib（20μM）处理乳腺癌细胞24小时,与空白组相比,流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示:MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞的Apatinib组、3MA+Apatinib组细胞凋亡率增加（P均<0.001）,且3MA+Apatinib组细胞凋亡率高于Apatinib组（P均<0.05）;Western blot检测凋亡、自噬相关蛋白结果显示:MDA-MB-231细胞,Apatinib组、3MA+Apatinib组Cleaved-Caspase3、LC3II/LC3I蛋白相对表达量增加（P均<0.05）;MCF-7细胞,3MA组、Apatinib组、3MA+Apatinib组细胞LC3II/LC3I蛋白相对表达量增加（P均<0.01）、Cleaved-PARP1、Bcl-2/Bax蛋白相对表达量减少（P均<0.05）。7.自噬抑制剂Bafilomycin A1（BafA1 4n M）处理乳腺癌细胞8小时后更换完全培养基或者Apatinib（20μM）处理乳腺癌24小时,与空白组相比,流式检测细胞凋亡、Western blot检测凋亡及自噬相关蛋白结果显示:MDA-MB-231和MCF-7细胞BafA1组、Apatinib组、BafA1+Apatinib组细胞凋亡率增加（P均<0.001）;MDA-MB-231细胞中,BafA1组、Apatinib组、BafA1+Apatinib组细胞LC3II/LC3I蛋白相对表达量增加、PARP1蛋白相对表达量减少（P均<0.05）;Apatinib组和BafA1+Apatinib组细胞Cleaved-Caspase3蛋白相对表达量增加（P均<0.01）;MCF-7细胞中,BafA1组和BafA1+Apatinb组细胞LC3II/LC3I蛋白相对表达量减少（P均<0.05）,Apatinib组细胞LC3II/LC3I蛋白相对表达量增加（P均<0.001）,BafA1组、Apatinib组、BafA1+Apatinib组细胞P62蛋白相对表达量减少（P均<0.01）,BafA1组细胞Cleaved-PARP1蛋白相对表达量降低、Apatinib组细胞Cleaved-PARP1蛋白相对表达量增加（P均<0.001）,BafA1组、Apatinib组细胞Cleaved-Caspase3蛋白相对表达量增加、BafA1+Apatinib组细胞Cleaved-Caspase3相对表达量减少（P均<0.05）。8.利用生物信息学分析阿帕替尼药物作用靶点VEGFR-2蛋白和MAPK信号通路蛋白分子间存在互作网络,与空白组相比,Western blot检测信号Erk1/2通路相关蛋白结果显示,MDA-MB-231细胞,实验组p-Erk1/2蛋白相对表达量减少（P<0.01）,Apatini b组、3MA+Apatinbi组、BafA1+Apatinbi组p-Erk1/2蛋白相对表达量减少（P均<0.05）;PD98059组、Apatinib组、PD98059+Apatinib组细胞p-Erk1/2蛋白相对表达量减少（P均<0.001）,Apatinib组、PD98059+Apatinib组细胞Erk1/2、Cleaved-Caspase3蛋白相对表达量减少（P均<0.01）,Apatinib组LC3II/LC3I蛋白相对表达量增加（P<0.05）,A patinib组、PD98059+Apatinib组细胞PARP1蛋白相对表达量减少（P均<0.001）;MC F-7细胞,实验组p Erk1/2、总Erk1/2蛋白相对表达量均减少（P<0.001和P<0.05）;A patinib组、3MA+Apatinib、BafA1+Apatinib组细胞p Erk1/2蛋白相对表达量减少（P均<0.05）;PD98059组、Apatinib组和PD98059+Apatinib组细胞p Erk1/2、Cleaved-Casp ase3蛋白相对表达量减少（P均<0.05）;PD98059+Apatinib组细胞LC3II/LC3I蛋白相对表达量增加（P<0.001）;PD98059组细胞P62蛋白相对表达量减少、Apatinib组和P D98059+Apatinib组细胞P62蛋白相对表达量增加（P均<0.05）。结论阿帕替尼抑制乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞增殖,增殖率与药物浓度呈负相关,以时间依赖性方式抑制乳腺癌细胞增殖;阿帕替尼诱导乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞凋亡,凋亡率与药物浓度呈正相关,阻滞MDA-MB-231、MCF-7细胞增殖的G0/G1期;阿帕替尼以浓度依赖性激活乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7细胞的自噬;自噬抑制剂3MA、BafA1协同阿帕替尼诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7凋亡;阿帕替尼与VEGFR-2特异性结合且抑制p-Erk1/2-Erk1/2信号通路及激活乳腺癌细胞自噬促进细胞凋亡。