研究目的:研究靶向调控Pin1的mi RNAs,探讨其在肝癌发生发展中所起的作用,为肝癌的诊断和治疗提供新的思路。研究方法:(1)应用Western blot和Q-PCR实验技术分别从蛋白水平和m RNA水平检测不同肝癌细胞系Hep G2,Huh7和Hep3B中Pin1的表达情况。(2)利用mi RNA靶基因预测软件数据库筛选出靶向调控Pin1的mi RNAs,然后通过双荧光素酶报告基因实验,Western blot实验,以及Q-PCR实验进行mi RNAs靶标验证。研究结果:(1)与正常的肝细胞LO2相比,在肝癌细胞系Hep G2,Huh7及Hep3B中,Pin1蛋白高表达,而Pin1 m RNA在Hep G2细胞中低表达,在Huh7和Hep3B细胞中则是高表达的。(2)利用mi RNA靶基因预测软件筛选出了4个mi RNAs(mi R-140-5p,mi R-429,mi R-200b,mi R-200c)。双荧光素酶报告基因实验和Western blot实验均显示mi R-140-5p作用后,萤火虫荧光素酶活性及Pin1蛋白下调最明显。实验结论:(1)与正常肝细胞相比,Pin1蛋白在不同肝癌细胞系Hep G2,Huh7和Hep3B中高表达;Pin1 m RNA在Hep G2细胞中低表达,而在Huh7和Hep3B细胞中高表达。(2)mi R-140-5p是Pin1基因的靶标mi RNA。