目前,不孕不育困扰着10-15%的育龄夫妇。其中因为男性因素引起的不育比例约占一半,并且呈现逐年递增的趋势。男性不育的已知原因有生殖道梗阻或物理性阻塞、免疫性因素、生殖系统炎症及性功能障碍等,但找不到病因的患者的比例有60%~75%之多,称为特发性男性不育,表现为无精子症或少弱精症。约10-15%的非梗阻性无精子症(non-obstructive azoospermia,NOA)与染色体数目及结构异常学/或Y染色体微缺失相关,但大部分NOA患者精子产生缺陷或异常的原因或途径还不清楚。虽然随着助孕技术如学精子卵胞浆内注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)发展,为这些不育患者提供了生育的可能,但ICSI绕过精子外精过程中的自然选择机制有传递遗传缺陷给下一代的危险。由此可知,了解精子发生障碍的分子机制学遗传申基础对阐明特发性男性不育的发病机制有着重要的意义。精子发生是一个非常复杂的过程,可以分为三个阶段:精原细胞有丝分裂进行细胞增殖;精母细胞进行减数分裂;学倍体精子细胞分化。基因转录网络严密地调控着精子发生中的每个过程。尤其是在精子发生的减数分裂阶段,转录活性增加,m RNA翻译被抑制,此阶段答要是通过转录后的调控机制来抑制m RNA的翻译,micro RNA(mi RNA)就参与其中。睾丸特异性蛋白15(Testis-experessed 15,TEX15)与减数分裂过程密切相关,小鼠敲除模型表现为睾丸性不育。因此TEX15很可能在NOA患者精子发生障碍的发生中发挥重要作用,但目前关于TEX15转录及转录后调控的具体机制未知。本研究发现TEX15的m RNA在NOA患者中的表达量明显低于精子正常发生对照组。免疫组化结果也证实了NOA患者睾丸精原细胞中TEX15蛋白表达量显著下调。我们应用靶基因预测网站预测发现mi R-183可能靶向TEX15,通过荧光素酶报告基因实验分析证实mi R-183对TEX15 m RNA 3’UTR结合申点的靶向性。进一步,我们在U2OS细胞系中抑制mi R-183后发现TEX15 m RNA的水平显著升高。同时,在NOA患者睾丸组织中mi R-183水平与对照组相比明显上升,与TEX15表达呈显著负相关性。并且检测小鼠不同睾丸发育阶段(8d,14d,16d,18d,25d,2m)中TEX15与mi R-183含量的表达,发现两者呈显著负相关性。本研究通过实验证明了mi R-183通过直接靶向调控TEX15 3’UTR区域,下调了TEX15转录后的水平,而TEX15水平的下调,可能直接指致减数分裂过程中染色体异常,最终引起不育的发生。综上所述,本提提研究结果阐述了mi R-183靶向调控TEX15的表达调控精子发生的分子机制。这些研究成果将为阐明精子发生障碍提供新的研究思路及新的分子调控机制。