背景:由于单份脐带血中细胞含量有限,限制了脐带血的临床应用,合适高效的体外扩增造血干细胞的培养体系成为了近年来的研究热点。我们近期的研究发现一个化合物组合可诱导扩增小鼠造血干/祖细胞,该化合物组合能否诱导人造血干细胞的体外扩增尚无报道。方法:本研究利用磁珠分选法分选出脐带血或骨髓中的CD34+细胞,在含细胞因子的无血清培养基中培养16小时后加入化合物组合（VPA+Repsox）,对照组加二甲基亚砜（Dimethyl sulfoxide,DMSO）,继续培养。培养7天,通过细胞计数、瑞氏-吉姆萨染色、流式细胞术、克隆形成实验检测扩增后细胞的表型和功能。接着通过羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（56-carboxyfluorescein diacetatesuccinimidyl ester,CFSE）实验观察细胞扩增的模式。为了验证化合物的有效性和安全性,我们进行了撤药实验,在加药的第6天撤药,每两天检测一次表型造血干细胞的比例。最后,通过联用其他种类的组蛋白去乙酰酶（Histone deacetylase,HDAC）抑制剂和转化生长因子β（transforming growth factorβ,TGFβ）通路抑制剂培养细胞后检测细胞扩增情况以及RNA测序初探化合物组合的作用机制。结果:化合物组合作用下培养脐带血造血干细胞7天后,有核细胞总数组间没有显著差异,但化合物组合处理后造血干细胞的百分比是仅使用VPA单一化合物处理组的5.80倍,是DMSO对照组的69.41倍。体外克隆形成实验中化合物组合组形成了更多的GEMM克隆。扩增前4天,化合物组合组的细胞分裂次数较对照组少,第6天撤药后细胞迅速分化。6种HDAC抑制剂中,广泛的HDAC抑制剂及选择性HDAC1/3抑制剂作用后能获得更高百分比的CD34+CD90+细胞,且添加不同靶向的TGFβ通路抑制剂后,CD34+CD90+细胞百分比均能进一步提高,其中Repsox的协同效果最明显。结论:VPA联合Repsox的化合物组合可以诱导人造血干细胞体外扩增,TGFβ通路抑制剂能显著增强HDAC抑制剂促进人造血干细胞增殖的作用。