论文部分内容阅读
背景结直肠癌是一种较为常见威胁人类生命健康的消化道恶性肿瘤,它的发病率较其他肿瘤高,易发生转移、侵袭身体其他器官,造成较高的死亡率。尽管对于结直肠癌的发生发展机制,目前科学界还未研究清楚,但是根据我们现有的研究显示,线粒体的解偶联蛋白2(uncoupling protein-2,UCP2)能够通过调节能量代谢而影响结直肠癌的发生发展好。UCP2是一种线粒体内膜蛋白,具有抑制活性氧簇的产生、抗细胞凋亡、维持线粒体膜稳定的能力,且可以影响巨噬细胞介导的免疫应答和炎症进程。UCP2通过负性调节ROS产生,减轻氧化应激反应,从而让肿瘤细胞对缺氧或化疗药物的耐受能力增强,UCP2的这种机制可以保护肿瘤细胞免受威胁。UCP2与肿瘤细胞的增殖及凋亡的调控能力有密切关系,通过调节肿瘤的微环境,制造出一种利于肿瘤细胞无限生长的条件,促进了肿瘤的发生发展。有研究证据显示,UCP2的表达可能会影响肿瘤细胞的侵袭与迁移。也有部分的研究发现,UCP2可能对结直肠癌的发生发展起着某些关键的作用。结直肠癌在早期一般无明显症状,很容易被患者所忽略,而出现症状后,肿瘤已经发展到晚期,所以对于结直肠癌的早期诊断,能提高患者的预后及生存时间。而UCP2可能作为结直肠癌的有效靶点,对早期的诊断与治疗有重要的意义。我们的研究着重分析UCP2的表达与结直肠癌患者预后的关联性,通过体外的细胞实验研究UCP2的表达对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响。目的探究UCP2在结直肠癌和癌旁组织的表达量;分析UCP2的表达与结直肠癌患者病理参数和预后的相关性;研究沉默UCP2的表达量后对结直肠癌细胞的侵袭和迁移能力的影响。方法采用免疫组织化学方法对100例结直肠癌患者肿瘤组织标本及癌旁组织标本的UCP2表达量进行检测。采用卡方检验方式分析UCP2与临床病理参数之间的相关性,应用Kaplan-Meier绘制生存曲线,应用Cox比例风险模型进行总体生存率和无复发生存期的单因素和多因素分析UCP2对结直肠癌患者预后的影响。采用RT-PCR和Western blot分别检测6株结直肠癌细胞系中UCP2的表达水平,挑选出两株显著高表达的细胞系(CACO2和SW1116)进行后续细胞功能实验;采用Si RNA转染技术,下调结直肠癌细胞系中UCP2的表达量,通过RT-PCR和Western blot进一步验证UCP2的下调效率。采用Transwell小室基质胶实验和划痕实验检测,分别检测沉默UCP2后对结直肠癌细胞侵袭及迁移能力的影响。结果1.免疫组织化学结果显示:UCP2在结直肠癌组织中的阳性及阴性表达率分别为72%(72/100)和28%(28/100),差异具有统计学意义(P<0.05)。2.分析临床病理参数发现:UCP2高表达与肿瘤T分期、N分期、M分期、TNM分期有明显相关性(P<0.05)。生存分析发现:UCP2高表达的结直肠癌患者相较于低表达的总体生存时间和无复发生存时间明显缩短(P<0.05)。COX回归分析发现:UCP2的表达是影响结直肠癌患者预后的一项独立危险因素。3.通过Transwell小室基质胶实验和划痕实验结果发现:下调结直肠癌细胞UCP2的表达量后可明显抑制结直肠癌细胞的侵袭和迁移的能力。结论1.UCP2在结直肠癌组织中表达显著上调,其表达水平与患者原发肿瘤侵犯的深度、阳性淋巴结数目、有无远处转移、TNM分期密切相关,UCP2表达是影响结直肠癌患者预后的一种独立危险因素。2.下调UCP2表达水平可明显抑制结直肠癌细胞的侵袭及迁移能力,UCP2在结直肠癌的发生发展过程中发挥着重要作用。