定点整合相关论文
中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells, CHO)是生产治疗性重组蛋白最常用的细胞。随机整合(random integration, RI)工艺是目......
近年来,肿瘤免疫疗法的迅速发展给许多癌症患者带来希望。其中,嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法在临床治疗过程中表现出很好的疗效而备受......
非淀粉多糖和植酸均是存在于饲料中的主要抗营养因子,能显著降低猪对饲料氮和磷的消化率,并造成氮、磷污染。前期研究中,本课题组......
中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞是目前生物制药领域应用广泛的生产细胞。传统构建重组细胞株的方法是将目的基因随机......
近几年,位点特异性整合的转基因猪的研究备受研究人员关注,但多基因定点整合的转基因猪却鲜有报道。通过CRISPR/Cas9介导的外源基......
猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea;PED)的病原体是猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus;PEDV),该病具有传播快、......
学位
干细胞是一类在特定条件下具有自我更新、增殖和分化等多种功能的细胞,它可以根据机体需要有组织地分化产生更多特异性的细胞类型,......
背景中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞是生产重组蛋白药物的首选宿主。传统稳定CHO细胞工程株主要是通过目的基因随机整......
外源基因在受体细胞或个体中持续稳定表达对于基础研究和转基因应用具有重要意义。传统转基因技术一般通过随机插入的方式将外源基......
背景 输注血细胞和移植造血干细胞是细胞治疗的常用手段,可以用来治疗遗传性疾病、恶性血液病和重症免疫缺陷等多种疾病.造血系细......
寻找中国仓鼠卵巢(CHO)细胞染色体上稳定表达位点是解决CHO细胞长期培养表达不稳定问题的有效手段。本课题组前期利用慢病毒转染将......
KIN基因是冷调控基因家族(COR)的重要成员,是十字花科植物中所特有的一类基因,能保护植物免受低温胁迫的损害,增强植物的抗冻......
FAD3基因是一种脂肪酸去饱和酶基因,编码ω-3多不饱和脂肪酸脱氢酶,能够将ω-6转化成ω-3多不饱和脂肪酸,提高ω-3多不饱和脂肪酸......
转基因动物的研究和生产是动物胚胎工程中最诱人和最有发展前景的课题之一.早期用受精卵原核内注射外源基因和利用精子作为载体将......
在大动物中,大多数性状属于数量性状,而水牛的产奶性状更是一个复杂的数量性状。在以往研究中多数是针对一个靶基因进行调控,很难......
学位
利用Cre/loxP系统介导的重组反应用于制备转基因定点整合山羊,已经在重组人溶菌酶转基因山羊的胎儿成纤维细胞内得到初步验证,并制......
以Kcmf1基因NW_003614172.1第629890碱基处定点整合ZsGreen1报告基因的CHO-K1细胞(2C3)为研究材料,采用倒置荧光显微镜和流式细胞......
目的运用DNA家族改组方法提高杀菌蛋白(BPI23)的杀菌活性. 方法首先将人、猴、兔BPI23基因的PCR产物等量混合,用DNAaseⅠ消化,回收......
目的:构建含有FRT序列的CHO/dhfr-工程细胞株,并在此细胞株中用定点整合系统表达抗基孔肯亚病毒人鼠嵌合抗体。方法:首先克隆FRT序......
重组腺相关病毒(rAAV)载体是一种具有高靶向性和良好安全性的病毒载体,在基因治疗中得到了较为广泛的应用。目前全球范围内已有70......
目的:构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体,并运用Flp-InTM定点整合表达系统建立稳定表达该细胞的CHO工程细胞......
基因打靶的同源重组发生率很低,难以满足基因打靶的应用要求。锌指核酸酶可以诱导DNA特定位点的双链断裂,从而大大提高同源重组的发......
血友病B(hemophilia B)是人凝血IX因子(human clotting factor Ⅸ, hFⅨ)缺乏所引起的一种出血性疾病。基因治疗是遗传型疾病根本......
在植物基因工程研究中,质体是继核转化之后又一新的遗传转化和表达受体.质体转化体系具有可同时进行多基因转化;细菌的基因和很有......
本研究利用CRISPR/Cas9介导,将无抗性无标记基因的hFAD3基因表达盒定点敲入牛NCAPG-LCORL位点,研究hFAD3基因的表达对脂肪酸含量,......
利用基因编辑技术可以实现多基因调控并培育转基因动物新品种。本研究利用CRISPR/Cas9技术,将肌肉特异性双向共表达打靶载体5arm-s......
脂肪酸去饱和酶-3(fatty acid desaturase 3, FAD3)基因编码n-3多不饱和脂肪酸脱氢酶,能够将n-6多不饱和脂肪酸(polyunsaturated f......
植物细胞中,遗传物质分布在细胞核、叶绿体和线粒体中。20世纪70年代诞生的基因工程技术,开创了人类按照自己的意愿在体外操纵生命......
输注血细胞和移植造血干细胞是细胞治疗的常用手段,可以用来治疗遗传性疾病、恶性血液病和重症免疫缺陷等多种疾病。造血系细胞也是......
利用叶绿体基因组在进化过程中高度保守的特点,根据烟草、水稻和玉米叶绿体基因组全序列资料,设计合成引物,PCR扩增并克隆了油菜叶绿......
利用奶牛rDNA基因间的ITS重复序列作为靶位点.对奶牛胎儿成纤维细胞进行多位点基因打靶,建立以重复序列为靶位点的多位点基因打靶......
锌指核酶(zinc finger nucleases,ZFNs)是将锌指蛋白的DNA识别域和非特异性核酸内切酶FokⅠ人工连接而构成的一种核酶.1对ZFNs能在......
利用PCR方法从pEGFP-N1中扩增pCMV-EGFP,从人基因组rDNA基因家族靶基因插入位点两侧分别扩增两条基因打靶同源重组引导序列DS1和DS......
采用两种类型的lox突变体和双色荧光报告基因,构建了双交换载体pCMVlox66-CreintEGFPlox2272和plox71RFPlox2272。将Cre酶基因插入......
目的探讨解决RNA干扰(RNA interference,RNAi)抗HBV作用时间短暂的问题。方法构建腺病毒/重组腺相关病毒(Adenovirus/recombinant ade......
Cre/LoxP系统是一种对转入基因进行组织特异性,定点操作的基因重组系统,可进行基因的定点整合、特定基因的组织特异性删除、基因的条件性重组......
本研究构建了含glnA基因片段和TPTⅡ基因的单交换整合型重组质粒pGN1-4,并通过电激法,三亲接合转移和二亲接合转移法号入到满江红......
【目的】构建猪瘟病毒主要抗原E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点转化载体,为百脉根叶绿体的转化及用叶绿体生产动物可直接食用疫......
叶绿体遗传转化系统是独立于细胞核遗传转化系统之外的转化系统,为植物导入外源基因提供了新的途径。叶绿体转化具有细胞核转化所......
利用奶牛rDNA基因间的ITS重复序列作为靶位点,对奶牛胎儿成纤维细胞进行多位点基因打靶,建立以重复序列为靶位点的多位点基因打靶技......
位点特异性重组系统能够在植物遗传转化中更准确、可靠的操纵外源DNA的引入或删除,已成为植物遗传操作中的重要工具。本文简要介绍......
传统转基因技术,如显微注射、转座子、慢病毒转染等将目的基因插入基因组内的整合方式是随机的,这些随机整合对后期转基因动物品系组......
从玉米幼嫩叶片中提取玉米叶绿体基因DNA,通过PCR克隆出叶绿体同源重组片段trnA和trnI、叶绿体特异性启动子Prrn以及终止子psbA.构......
从小麦中分别克隆了包括rbcL基因3′端部分和完整的psaI、ycf4基因的DNA片段.利用克隆到的DNA片段作为同源重组片段、烟草叶绿体16......
以基因枪法进行了油菜叶绿体基因组的定点转化.载体pNRAB携带抗壮观霉素的筛选标记基因aadA和抗虫基因cry1Aa10,基因的两侧被添加......
针对转基因鱼技术中关于启动子和结构基因的选配、外源基因的定点整合、外源基因的可控表达、转基因鱼鉴定、建立转基因鱼纯系个体......