【摘 要】
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中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary cells, CHO）是生产治疗性重组蛋白最常用的细胞。随机整合（random integration, RI）工艺是目前构建重组CHO细胞株的主要策略，由于CHO细胞基因组缺乏稳定性，为得到产量高、品质好且适应特定工艺的细胞株，通常需要1～2轮高通量筛选，不仅工作量大、耗时长且批次稳定性差。定点整合（site-specific int
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中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary cells, CHO）是生产治疗性重组蛋白最常用的细胞。随机整合（random integration, RI）工艺是目前构建重组CHO细胞株的主要策略，由于CHO细胞基因组缺乏稳定性，为得到产量高、品质好且适应特定工艺的细胞株，通常需要1～2轮高通量筛选，不仅工作量大、耗时长且批次稳定性差。定点整合（site-specific integration, SSI）基因编辑技术将外源基因整合至细胞基因组的特定位点，经一轮筛选得到稳定、高产且适应特定生产工艺的细胞株，从而缩短细胞株构建周期。近年来，不断有将定点整合策略应用于构建重组CHO细胞株的报道。基因编辑技术的发展是实现细胞外源基因定点整合工艺的基础，常用的基因编辑技术包括核酸酶技术、转座子技术和重组酶技术。比较这三种基因编辑技术在构建流程、整合效率和专利等方面的不同特点，重点讨论重组酶介导的定点整合及其在CHO细胞株构建中的应用。
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