定点整合相关论文
中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary cells, CHO）是生产治疗性重组蛋白最常用的细胞。随机整合（random integration, RI）工艺是目......
近年来,肿瘤免疫疗法的迅速发展给许多癌症患者带来希望。其中,嵌合抗原受体（CAR）T细胞疗法在临床治疗过程中表现出很好的疗效而备受......
非淀粉多糖和植酸均是存在于饲料中的主要抗营养因子,能显著降低猪对饲料氮和磷的消化率,并造成氮、磷污染。前期研究中,本课题组......
中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary,CHO）细胞是目前生物制药领域应用广泛的生产细胞。传统构建重组细胞株的方法是将目的基因随机......
近几年,位点特异性整合的转基因猪的研究备受研究人员关注,但多基因定点整合的转基因猪却鲜有报道。通过CRISPR/Cas9介导的外源基......
猪流行性腹泻（Porcine Epidemic Diarrhea;PED）的病原体是猪流行性腹泻病毒（Porcine Epidemic Diarrhea Virus;PEDV）,该病具有传播快、......
学位
干细胞是一类在特定条件下具有自我更新、增殖和分化等多种功能的细胞,它可以根据机体需要有组织地分化产生更多特异性的细胞类型,......
背景中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary,CHO）细胞是生产重组蛋白药物的首选宿主。传统稳定CHO细胞工程株主要是通过目的基因随机整......
外源基因在受体细胞或个体中持续稳定表达对于基础研究和转基因应用具有重要意义。传统转基因技术一般通过随机插入的方式将外源基......
在大动物中,大多数性状属于数量性状,而水牛的产奶性状更是一个复杂的数量性状。在以往研究中多数是针对一个靶基因进行调控,很难......
学位
利用Cre/loxP系统介导的重组反应用于制备转基因定点整合山羊,已经在重组人溶菌酶转基因山羊的胎儿成纤维细胞内得到初步验证,并制......
目的运用DNA家族改组方法提高杀菌蛋白(BPI23)的杀菌活性. 方法首先将人、猴、兔BPI23基因的PCR产物等量混合,用DNAaseⅠ消化,回收......
重组腺相关病毒(rAAV)载体是一种具有高靶向性和良好安全性的病毒载体,在基因治疗中得到了较为广泛的应用。目前全球范围内已有70......
本研究利用CRISPR/Cas9介导,将无抗性无标记基因的hFAD3基因表达盒定点敲入牛NCAPG-LCORL位点,研究hFAD3基因的表达对脂肪酸含量,......
利用基因编辑技术可以实现多基因调控并培育转基因动物新品种。本研究利用CRISPR/Cas9技术,将肌肉特异性双向共表达打靶载体5arm-s......
脂肪酸去饱和酶-3(fatty acid desaturase 3, FAD3)基因编码n-3多不饱和脂肪酸脱氢酶,能够将n-6多不饱和脂肪酸(polyunsaturated f......
植物细胞中,遗传物质分布在细胞核、叶绿体和线粒体中。20世纪70年代诞生的基因工程技术,开创了人类按照自己的意愿在体外操纵生命......
利用叶绿体基因组在进化过程中高度保守的特点，根据烟草、水稻和玉米叶绿体基因组全序列资料，设计合成引物，PCR扩增并克隆了油菜叶绿......
利用奶牛rDNA基因间的ITS重复序列作为靶位点.对奶牛胎儿成纤维细胞进行多位点基因打靶,建立以重复序列为靶位点的多位点基因打靶......
Cre/lox系统是源于P1噬菌体的一个DNA重组体系,它能导致在特定的DNA序列(loxP位点)处发生定点重组.该系统可以将外源基因定点整合......
锌指核酶(zinc finger nucleases,ZFNs)是将锌指蛋白的DNA识别域和非特异性核酸内切酶FokⅠ人工连接而构成的一种核酶.1对ZFNs能在......
利用PCR方法从pEGFP-N1中扩增pCMV-EGFP,从人基因组rDNA基因家族靶基因插入位点两侧分别扩增两条基因打靶同源重组引导序列DS1和DS......
采用两种类型的lox突变体和双色荧光报告基因,构建了双交换载体pCMVlox66-CreintEGFPlox2272和plox71RFPlox2272。将Cre酶基因插入......
目的探讨解决RNA干扰（RNA interference,RNAi）抗HBV作用时间短暂的问题。方法构建腺病毒/重组腺相关病毒（Adenovirus/recombinant ade......
【目的】构建猪瘟病毒主要抗原E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点转化载体,为百脉根叶绿体的转化及用叶绿体生产动物可直接食用疫......
叶绿体遗传转化系统是独立于细胞核遗传转化系统之外的转化系统,为植物导入外源基因提供了新的途径。叶绿体转化具有细胞核转化所......
传统转基因技术，如显微注射、转座子、慢病毒转染等将目的基因插入基因组内的整合方式是随机的，这些随机整合对后期转基因动物品系组......
从玉米幼嫩叶片中提取玉米叶绿体基因DNA,通过PCR克隆出叶绿体同源重组片段trnA和trnI、叶绿体特异性启动子Prrn以及终止子psbA.构......
从小麦中分别克隆了包括rbcL基因3′端部分和完整的psaI、ycf4基因的DNA片段.利用克隆到的DNA片段作为同源重组片段、烟草叶绿体16......
以基因枪法进行了油菜叶绿体基因组的定点转化.载体pNRAB携带抗壮观霉素的筛选标记基因aadA和抗虫基因cry1Aa10,基因的两侧被添加......
针对转基因鱼技术中关于启动子和结构基因的选配、外源基因的定点整合、外源基因的可控表达、转基因鱼鉴定、建立转基因鱼纯系个体......
运用Flp-InTM定点整合表达系统构建表达组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,t-PA)的CHO工程细胞株.将pcDNA5......
试验旨在构建一个能够定点整合且无筛选标记基因的半乳糖苷酶基因LacS表达载体。本研究以pEGFP-N1质粒为原始框架,通过PCR及限制性......
本文首先将pFRT/lacZeo质粒转染CHO-K1细胞,经半乳糖苷酶活性检测筛选得到了含高活性位点的细胞株CHO/FRT2.通过定点突变对NESPl(......
山羊绒是一种珍贵的特种动物纤维,具有极高的经济价值。阿尔巴斯绒山羊是经过长期自然选育形成的优良地方性绒肉兼用型品种,生产的......
中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary,CHO）已是应用最为广泛的生物技术药物生产细胞,构建稳定表达治疗性生物制品的CHO工程细胞......
学位
叶绿体转化系统，独立于传统的核转化，为植物导入外源基因提供了新途径。它有如下优点：超量表达目的基因；以定点整合方式导入外源基因从......
<正>定点整合是一种指导目的基因以精确单拷贝进入基因组预定位点的转基因技术,用于解决常规转基因技术带来的系列问题[1-2]。在拟......
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外源基因随机整合带来的位置效应以及转基因效率低下是目前制约转基因动物发展的主要瓶颈问题,本文拟利用重组酶介导的盒式交换反......
构建了一个带有ＦＲＴ位点以及启动子缺陷的ＵＲＡ３ｄ 选择标记的环状质粒，并通过位点特异性重组将其整合到酵母染色体ｒＤＮＡ中放置的一个ＦＲＴ位点上。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分......
血管内皮生长因子具有特异性促进内皮细胞增殖，诱发新生血管生长的作用。利用血管内皮生长因子（VEGF）基因诱导治疗性新生血管生成，从而......
目的：探讨解决RNA干扰（RNAi）抗HBV作用时间短暂的问题。方法：构建腺病毒／重组腺相关病毒（Ad／rAAV）杂合体病毒，恢复rAAV的定点整合，并借助定点......
本研究选择在中国仓鼠卵巢(chinese hamster ovary，CHO)细胞中表达具有中和活性的抗基孔肯亚(chikungunya，Chik)病毒的嵌合抗体，以图......
α-乳白蛋白(alpha-lactalbumin,α-LA)是乳清蛋白中主要的钙结合蛋白,同时还是乳糖合成酶的一个亚基,控制着乳糖的合成。α-LA能......
结核病是威胁全球健康的慢性传染性人畜共患病,目前缺乏有效的预防和根治方法。目前认为结核病的发病机理是:致病性结核分支杆菌通......
目的：非霍奇金淋巴瘤(Non Hodgkin’s lymphoma, NHL)是免疫系统最常见的恶性肿瘤,并且其发病率和死亡率逐年上升。人淋巴细胞分化......
