FLP介导的酿酒酵母rDNA多拷贝定点整合

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构建了一个带有FRT位点以及启动子缺陷的URA3d 选择标记的环状质粒,并通过位点特异性重组将其整合到酵母染色体rDNA中放置的一个FRT位点上。Southern杂交分析表明若处于很强的选择压力下,该质粒的拷贝数会发生有效的扩增。为了证明该质粒能够作为表达载体, 将乙肝融合表面抗原SA-28基因的表达单元插入该质粒后整合到rDNA位点。与rDNA位点整合了单个表达单元的菌株相比,SA-28蛋白的表达量提高了30~60倍。
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