【摘 要】
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利用重组杆状病毒表达的猪圆环病毒2型（PCV2）Cap蛋白免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术,共获得6株能稳定分泌抗Cap蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3H9/1H5、3H9/3C7、4A9/3E2、4A9/3D7、6G7/7B6和6G7/8D3,并通过ELISA、Western-blotting和间接免疫荧光试验（IFA）对6株单抗的特性和抗原表位进行分析鉴定。结果显示,6株杂交瘤细胞培养
【机 构】
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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
【基金项目】
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农业部行业专项（200903036-4,200803020-5）； 江苏省教育厅产业发展项目（JH09-1）； 教育部博士点基金项目（20090097120025）； 江苏省自然科学基金项目（BK2010450）；
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利用重组杆状病毒表达的猪圆环病毒2型（PCV2）Cap蛋白免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术,共获得6株能稳定分泌抗Cap蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3H9/1H5、3H9/3C7、4A9/3E2、4A9/3D7、6G7/7B6和6G7/8D3,并通过ELISA、Western-blotting和间接免疫荧光试验（IFA）对6株单抗的特性和抗原表位进行分析鉴定。结果显示,6株杂交瘤细胞培养上清的抗体效价为1∶1 024～1∶2 048,腹水效价为1∶163 840～1∶204 800。3H9/1H5、3H9/3C7、6G7/7B6和6G7/8D3的亚型为IgG1型,4A9/3E2和4A9/3D7为IgG2b型,所有单抗的轻链均为κ型。Western-blotting和IFA结果表明6株单抗均能与重组Cap蛋白和PCV2产生特异性反应。相加ELISA结果显示,6株单抗可能识别不同的抗原表位。为准确鉴别不同单抗针对的抗原位点,以截短表达的重组Cap蛋白为抗原,进行Western-blot鉴定。结果显示,4A9/3E2与4A9/3D7的抗原表位位于101～150aa,其余4株单抗可能针对1～50aa或者天然构象表位。本研究获得6株PCV2Cap特异性单抗,鉴定了其识别的抗原表位,为PCV2诊断和致病机理的研究提供了工具。
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