【摘 要】
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为制备猪圆环病毒4型（PCV4）Cap蛋白单克隆抗体，以原核表达的重组Cap蛋白免疫6～8周龄小鼠，三次免疫后取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。利用亚克隆技术和间接免疫荧光（IFA）方法筛选到2株阳性单克隆杂交瘤细胞株，分别命名为5H9和2F3。间接免疫荧光和Western blot试验表明，2株单抗均能特异性识别293T细胞中特异表达的Cap蛋白，且5H9和2F3的IFA效价分别为
【基金项目】
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江苏现代农业（生猪）产业技术体系疾病防控创新团队（JATS【2021】358）；
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为制备猪圆环病毒4型（PCV4）Cap蛋白单克隆抗体，以原核表达的重组Cap蛋白免疫6～8周龄小鼠，三次免疫后取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。利用亚克隆技术和间接免疫荧光（IFA）方法筛选到2株阳性单克隆杂交瘤细胞株，分别命名为5H9和2F3。间接免疫荧光和Western blot试验表明，2株单抗均能特异性识别293T细胞中特异表达的Cap蛋白，且5H9和2F3的IFA效价分别为1∶12 800和1∶6 400。亚类鉴定结果表明，两株单抗重链均属于IgG1,轻链类型为kappa型。本研究制备的抗PCV4 Cap特异性单抗，为PCV4检测方法的建立和流行病学调查提供了有效的生物材料，也为该病毒的分离鉴定与Cap蛋白功能的探究奠定了基础。
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