背景:PCV3于2016年首次被美国学者报道,是从流产胎儿中检测到的一种新型的猪圆环病毒,其母猪具有PDNS临床病症,且PCV2阴性,之后的回溯性分析表明,PCV3可能是丘疹性皮炎、肾病变、生殖障碍和多器官炎症这些临床病症的主要致病因子。流行病学调查显示,PCV3在世界范围内的流行已十分常见。中国已经在多省份检测到PCV3,说明其在我国流行程度也已经相当广泛。然而,对于这个病毒目前我们还是知之甚少。PCV3的生物特性、致病性以及其感染情况还需要更深入的研究探讨。同时,基于现有的阳性样品多来自于PDNS等发病猪场,PCV3的出现值得引起我们的关注和预防。目的:获得针对PCV3的特异性抗体是建立PCV3病原免疫学检测方法的关键。与多抗相比,单抗纯度高、特异性强、重复性好、且能持续地无限量供应,在免疫检测中具有更广泛的研究应用价值和商业使用价值。因此,本研究旨在筛选可用于PCV3病毒抗原检测的特异性单克隆抗体。方法:本研究以原核表达的PCV3 Cap蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,采用聚乙二醇诱导进行细胞融合10天后,利用IPMA试验法以构建的PCV3 Cap蛋白真核表达载体pcDNA3.1-Cap转染HEK293T细胞,对融合成功的杂交瘤细胞孔进行筛选,然后再对阳性孔进行亚克隆以获得稳定分泌抗猪圆环病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,再通过体内诱生腹水的方法大量制备抗猪圆环病毒的单克隆抗体,最后对获得的单抗进行免疫学鉴定。结果 :通过杂交瘤技术筛选得到1株能够稳定分泌抗PVC3Cap蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为6B2。该单抗与PRV,PRRSV,CSFV,PEDV,PCV2无交叉反应。Western-blot结果显示,该单抗与原核表达以及真核表达的PCV3 Cap蛋白均产生特异性反应。该抗体能否检测组织病料中的PCV3病毒抗原,还需进一步的试验验证。结论:本研究所获得的单克隆抗体为PCV3特异性诊断提供试剂,为PCV3的病原学诊断及研究奠定了基础。