【摘 要】
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目的 探讨miR-98是如何通过抑制RHOA的表达结肠癌细胞上皮细胞间充质转化 (EMT) 的.方法 采用逆转录聚合酶链反应 (real time PCR) 分析40对结肠癌标本中miR-98和介导EMT发生的转录因子RHOA蛋白的相关性, MIRDB预测miR-98与RHOA的结合位点后, 利用荧光素酶报告基因实验检测miR-98对RHOA的靶向作用.接下来通过transwell实验验证miR-98对HCT116细胞的迁移影响, 并通过western blot实验检测miR-98对RHOA、e-cad、
【机 构】
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辽宁中医药大学附属医院肛肠科,辽宁 沈阳,110032;中国医科大学公共基础学院英一教研室,辽宁 沈阳,110122
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目的 探讨miR-98是如何通过抑制RHOA的表达结肠癌细胞上皮细胞间充质转化 (EMT) 的.方法 采用逆转录聚合酶链反应 (real time PCR) 分析40对结肠癌标本中miR-98和介导EMT发生的转录因子RHOA蛋白的相关性, MIRDB预测miR-98与RHOA的结合位点后, 利用荧光素酶报告基因实验检测miR-98对RHOA的靶向作用.接下来通过transwell实验验证miR-98对HCT116细胞的迁移影响, 并通过western blot实验检测miR-98对RHOA、e-cad、vim蛋白的调节作用.结果 结肠癌患者中miR-98和RHOA的表达水平呈负相关, miR-98与RHOA的3UTR区域具有结合位点, miR-98可以直接作用于RHOA, 抑制HCT116细胞的迁移能力, 对HCT116细胞EMT的抑制在一定程度上是通过miR-98对RHOA、e-cad、vim蛋白的调节作用实现的.结论 miR-98抑制RHOA的活性, 进而抑制结肠癌细胞的EMT.“,”Objective To investigate the effect of miR-98 on epithelial-mesenchymal transition (EMT) of human colon cancer cells. Methods The correlation between miR-98 and RHOA protein was analyzed in 40 specimens with colon cancer by real time PCR. The effect of miR-98 on HCT116 cell migration was analyzed by Transwell assay. Western blot was used to detect the effect of miR-98 on the expressions of RHOA, e-cad and vim proteins. Results MiR-98 was negatively correlated with the expression of RHOA in patients with colon cancer. miR-646 can directly act on EGFR. miR-98 inhibited the migration ability of HCT116 cells, inhibited the migration ability of HCT116 cells to some extent by miR-98 inhibition of RHOA, e-cad and vim proteins. Conclusion MiR-98 can inhibit the EMT of colon cancer cells by inhibiting the activity of RHOA.
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