【摘 要】
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目的 探讨miR-155促进Th17分化的作用途径.方法 分离小鼠脾CD4+T细胞,加促Th17分化的白介素刺激培养后,转染miR-155过表达或抑制慢病毒载体,流式检测CD4+T细胞IL-17的表
【机 构】
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广东医学院附属深圳福田医院香蜜湖分院 广东医学院风湿病研究所
【出 处】
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2015年第十三届全国风湿病学术会议
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目的 探讨miR-155促进Th17分化的作用途径.方法 分离小鼠脾CD4+T细胞,加促Th17分化的白介素刺激培养后,转染miR-155过表达或抑制慢病毒载体,流式检测CD4+T细胞IL-17的表达；ELISA检测细胞培养液IL-17分泌水平；荧光定量PCR检测miR-155、IL-17A和Ets-1 mRNA的表达.筛选Ets-1的siRNA干扰序列,检测si-Ets与miR-155共同作用对Th17分化的影响.结果 对照未刺激组几乎不表达和分泌IL-17,对照刺激组表达IL-17的细胞和分泌IL-17增多；miR-155过表达组表达IL-17细胞百分比和分泌IL-17水平明显高于对照刺激组和miR-155抑制组,P＜0.01.miR-155过表达组miR-155、IL-17A mRNA高表达,Ets-1 mRNA低表达,与其他三组相比P＜0.05.设计了三条针对Ets-1基因的siRNA,其中si-Ets-2＃抑制效果最好.si-Ets-2#或si-Con与miR-155过表达或抑制慢病毒载体进行共转染,si-Ets-2#组均比si-Con组IL-17A mRNA表达上调,而Ets-1 mRNA表达下调,Western检测也可以看出si-Ets-2#组的Ets-1蛋白表达下降,在miR-155过表达组下降更为明显.结论 miR-155可以通过抑制Ets-1的表达而促进CD4+T细胞向Th17细胞分化.
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