【摘 要】
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毛酸浆,一种一年生草本植物,既可食用,又具有药理作用。本文主要对毛酸浆茎部提取的多糖进行分离纯化,结构解析,并研究其生物活性。研究结果如下:采用水回流法提取毛酸浆茎部粗多糖,用酶解法+Sevage法去蛋白,考马斯亮蓝法检测蛋白含量,然后对粗多糖进行脱色,并依次使用纤维素柱色谱（DEAE）和凝胶柱色谱（G200）对脱色后多糖纯化后,得到四个天然毛酸浆茎部多糖PPLS-1、PPLS-2、PPLS-3、
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毛酸浆,一种一年生草本植物,既可食用,又具有药理作用。本文主要对毛酸浆茎部提取的多糖进行分离纯化,结构解析,并研究其生物活性。研究结果如下:采用水回流法提取毛酸浆茎部粗多糖,用酶解法+Sevage法去蛋白,考马斯亮蓝法检测蛋白含量,然后对粗多糖进行脱色,并依次使用纤维素柱色谱（DEAE）和凝胶柱色谱（G200）对脱色后多糖纯化后,得到四个天然毛酸浆茎部多糖PPLS-1、PPLS-2、PPLS-3、PPLS-4。高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定四个纯化多糖的分子量分别为12.6 KDa,11.6 KDa,23.4 KDa,19.9 KDa。采用高效液相色谱法（HPLC）分析纯化多糖单糖组成,结果表明PPLS-1是由Rha、Ara、Man和Gal组成,摩尔比为0.14:0.46:0.09:0.31;PPLS-2是由Rha、Ara、Man和Gal组成,摩尔比为0.09:0.63:0.05:0.23;PPLS-3是由Rha、Ara、Man组成,摩尔比为0.37:0.46:0.17;PPLS-4是由Rha、Ara、Man组成,摩尔比为0.26:0.59:0.15。通过核磁分析得到:PPLS-1是主要包含→4)-β-D-Manp-（1→,α-D-Galp,→5）-α-L-Araf（1→和→2）-α-D-Rhap（1→片段,PPLS-2主要片段为→2,4）-α-L-Rhap（1→,1,4-β-D-Manp,→5）-α-L-Araf（1→和α-Galp,PPLS-3主要片段为1,4-β-D-Manp,→4,2）-D-Rha-(1→和α-L-Araf（1→,PPLS-4主要片段为→3,4）-α-l-Arap（1→和→2）-α-D-Rhap-(1→。另外,采用扫描电镜（SEM）和热重分析（TGA）法分析了多糖的表面形貌和热稳定性,并进一步研究了四种天然多糖的体外抗氧化活性和对H2O2诱导的氧化损伤模型的保护作用。体外抗氧化活性测试结果显示PPLS-1、PPLS-2、PPLS-3、PPLS-4对DPPH和ABTS自由基均有清除作用,且剂量依赖性;通过建立H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤模型,结果表明毛酸浆茎部得到的四个多糖对H2O2诱导的SH-SY5Y细胞模型具有较好的神经保护活性。对氧化应激指标的检测实验结果表明,加入多糖样品PPLS-1后MDA含量水平呈逐步降低的趋势并且具有剂量效应,同时,SOD、T-AOC、GSH-Px均呈上升的趋势。H2O2增加了丙二醛的产生,降低了抗氧化酶的活性,而PPLS-1有效地抑制了丙二醛的形成,调节了细胞内抗氧化酶的活性,表明PPLS-1有效地减轻了H2O2诱导的氧化应激。其机制可能是PPLS-1通过将内源抗氧化酶活性维持在正常水平来抑制ROS的生成。
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