【摘 要】
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目的:本实验旨在观察通利三焦、清热利湿方对Ig A肾病大鼠肾组织中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）表达的影响,以探讨通利三焦、清热利湿方治疗Ig AN大鼠的可能疗效机制,为临床通利三焦、清热利湿方治疗Ig A肾病的研究及安全推广应用提供实验依据。方法:首先将购进的48只体重在150-180g的雄性健康清洁级SD大鼠随机分为正常组
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目的:本实验旨在观察通利三焦、清热利湿方对Ig A肾病大鼠肾组织中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）表达的影响,以探讨通利三焦、清热利湿方治疗Ig AN大鼠的可能疗效机制,为临床通利三焦、清热利湿方治疗Ig A肾病的研究及安全推广应用提供实验依据。方法:首先将购进的48只体重在150-180g的雄性健康清洁级SD大鼠随机分为正常组（N）,模型组（M）,贝那普利组（B）,中药组（Z）共四组,在动物实验室将大鼠适应性饲养1周后,采用联合牛血清白蛋白（BSA）灌胃+尾静脉注射脂多糖（LPS）+皮下注射四氯化碳（CCL4）、蓖麻油的免疫复合的方法复制Ig AN大鼠模型。制备模型成功后四组分别进行为期4周的干预治疗。并在实验的不同阶段将大鼠置于代谢笼中检测24小时尿蛋白定量（24h-UTP）。在实验第14周,将各组大鼠处死,留取血清、肾脏组织标本用以检测各组生化中相关指标的含量,及肾组织中MCP-1、MIF、ICAM-1的表达变化。结果:1.在本实验中,N组大鼠整体状况良好,M组、B组、Z组在造模开始后显现皮毛杂乱逐渐失去光泽,精神变差,体重不增或减轻;B组、Z组在给予相应的药物治疗后,两组大鼠的精神、饮食、体重及毛发毛色等状况均较M组有所好转,实验过程中大鼠无死亡,本实验结束时四组大鼠有效数量:N组12只,M组12只,B组12只,Z组12只。2.实验至10周造模结束时,与N组比较,M、B、Z三组大鼠24小时尿蛋白定量（24h-UTP）均显著升高,差异有统计学意义（P<0.01）;实验至14周药物干预结束时,与N组比较,M组大鼠24h-UTP显著升高,差异有统计学意义（P<0.01）,与同期M组比较,B组、Z组大鼠24h-UTP均显著降低,差异有统计学意义（P<0.01）,B组、Z组大鼠24h-UTP统计无差异（P>0.05）。3.N、M、B、Z组实验大鼠的血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、血浆白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）的含量相比无统计学意义（P>0.05）。总胆固醇（TC）与N组相比,M组明显升高（P<0.01）,与M组比较,B组、Z组表达下降（P<0.05）,B组与Z组表达水平无统计学差异（P>0.05）。4.光镜、电镜及免疫荧光观察N组大鼠肾脏结构清晰,无异常病理改变,M组病理损伤最显著,与M组比较,B组、Z组病理损伤一定程度上明显改善。5.免疫组化法观察ICAM-1及Western Blot法观察MCP-1、MIF在大鼠肾脏组织表达,与N组比较,M组大鼠表达明显上调（P<0.01）;与M组比较,B组、Z组表达下调（P<0.05）;B组与Z组相比,表达水平无统计学意义（P>0.05）。6.RT-PCR法观察大鼠肾组织MCP-1m RNA、MIFm RNA、ICAM-1m RNA的表达,与N组比较,M组大鼠表达明显增强（P<0.01）;与M组比较,B组、Z组表达下降（P<0.05）;B组与Z组表达水平无统计学差异（P>0.05）7.ELISA法观察大鼠血液中MCP-1、MIF、ICAM-1的表达,与N组相比较,M组MCP-1、MIF及ICAM-1在血清中表达明显升高（P<0.01）,与M组比较,B组、Z组MCP-1、MIF及ICAM-1表达下降（P<0.05）,B组与Z组MCP-1、MIF、ICAM-1比较无显著性差异（P>0.05）。结论:1.通利三焦、清热利湿方可明显降低Ig A肾病大鼠24小时尿蛋白定量,可以保护肾脏结构和功能,并且其疗效与贝那普利相当。2.通利三焦、清热利湿方可明显减轻Ig A肾病的病理变化,缓解Ig A肾病的进展,并且其疗效与贝那普利相当。3.通利三焦、清热利湿方可明显降低Ig A肾病大鼠肾组织中MCP-1、MIF、ICAM-1的表达,减弱其在血清中的表达,减少炎性细胞在肾局部浸润,减轻Ig A肾病系膜细胞及胞外基质的增殖改建,恢复免疫平衡,延缓本病的进程,并且其疗效与贝那普利相当。
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