西沙群岛草海桐病害鉴定、防治药剂筛选及生防菌资源挖掘

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西沙群岛地处我国热带海域,植被种类稀少,生态环境脆弱。了解当地植被分布、病害发生规律及防治措施,是更好保护当地植物资源的前提。草海桐(Scaevola taccada)是西沙群岛各岛礁主要原生植被之一,在热带岛礁上表现出良好的适应能力。2018-2019年在西沙群岛植被病害调查时发现,草海桐病害发生普遍,且部分病害较为严重,对其生长发育造成一定的影响。基于此,笔者开展了西沙群岛草海桐病害鉴定、防治药剂筛选及生防菌资源挖掘工作。研究结果如下:1.从草海桐病株上分离获得64株菌株,通过致病性测定获得较强致病力菌株5株,通过形态学特征观察及分子鉴定,确定它们分别为长柄链格孢菌(Alternaria longipes)、小新壳梭孢菌(Neofusicoccum parvum)、可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)、N.ribis和L.hormozganensis。2.对长柄链格孢菌(A.longipes)、小新壳梭孢菌(N.parvum)、可可毛色二孢菌(L.theobromae)进行了生物学特性研究和杀菌剂室内毒力测定,结果表明:(1)A.longipes菌落最适生长培养基为PDA;最适生长温度为28℃;最适pH值为6.0;最佳碳源为蔗糖;最佳氮源为甘氨酸;光照条件对菌落生长无显著影响;菌丝致死温度为70℃,30 min或75℃,10 min。室内毒力测定结果表明,10%苯醚甲环唑水分散粒剂的抑菌作用最好,EC50值为0.15μg/m L。(2)N.parvum菌落最适生长培养基为PDA;最适生长温度为28℃;最适pH值为8.0;最佳碳源为果糖;最佳氮源为硝酸钠;12 h光照+12 h黑暗和全光照菌落生长较好;菌丝致死温度为50℃处理30 min。室内毒力测定结果表明,25%吡唑醚菌酯悬浮剂和10%苯醚甲环唑水分散粒剂的抑制效果最好,EC50值都为0.003μg/m L。(3)L.theobromae菌落最适生长培养基为PDA;最适生长温度为28℃;最适pH值为5.0;最佳碳源为蔗糖;最佳氮源为硝酸铵;光照条件对菌落生长无显著影响;菌丝致死温度为50℃处理10 min。室内毒力测定结果表明,50%多菌灵可湿性粉剂的抑菌效果最好,EC50值为0.04μg/m L。.3.以长柄链格孢菌(A.longipes)和胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)作为供试病原菌,采用平板对峙法,从西沙群岛土样中分离获得1株抑制效果最好的拮抗菌(编号:ZSZJ-5)。经生理生化及分子特征鉴定,ZSZJ-5为竹沥链霉菌(Streptomyces bambusae)。其对21种植物病原菌具有广谱抑菌活性。4.通过培养优化筛选,确定竹沥链霉菌最佳培养条件为小米液体培养基;pH值7.0;温度28℃,培养时间7 d。优化后发酵液对A.longipes、N.parvum、L.theobromae的抑制率达70%以上。5.研究了竹沥链霉菌发酵液的热稳定性、酸碱稳定性和紫外光照稳定性。结果表明,发酵液80℃,30 min,抑菌效果与对照无差异。pH 2-12紫外光照射7 h对发酵液活性影响不大,抑制率没有明显下降,抑制率保持在60%左右。6.采用平板对扣法,发现竹沥链霉菌发酵液中挥发物对A.longipes、N.pa rvum、L.theobromae均有抑制作用,抑制率在10-20%。对竹沥链霉菌发酵液差异代谢产物进行分析,在挥发性气体中检测出3种抑菌化合物,分别为3-dih ydro-3,5-dihydroxy-6-methyl,Phenol,2,4-bis(1,1-dimethylethyl)和Phenol,2,2’-methyl enebis[6-(1,1-dimethylethyl)-4-methyl]。从竹沥链霉菌发酵液中分离出一个具有抑菌活性的化合物:1,8-dihydroxy-3-hydroxymethyl-Benzaanthracene-7,12-dione,其抑菌活性需要进一步研究。
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