玫烟色棒束孢(Isaria fumosorosea)是农业害虫防治中常用的重要昆虫病原真菌之一,分布广泛、环境适应能力强,可寄生多达25个科的昆虫,包括烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)、棉蚜Aphis gossypii Glover、小菜蛾Plutella xylostella L.、斜纹夜蛾Spodoptera litura(Fabricius)等一些重要的农业害虫。本文以烟粉虱和玫烟色棒束孢为研究材料,通过测定玫烟色棒束孢处理后烟粉虱第1、3、5代若虫的存活率和若虫体内4种酶活力的变化,研究了玫烟色棒束孢对烟粉虱若虫的影响;通过测定玫烟色棒束孢处理后烟粉虱第1、3、5代成虫产卵量的变化,观察处理后烟粉虱卵巢结构的变化和玫烟色棒束孢菌丝、代谢产物毒素对烟粉虱生殖系统的破坏,明确了玫烟色棒束孢对烟粉虱生殖的影响,主要研究包括以下几个方面:(1)玫烟色棒束孢对烟粉虱若虫存活率的影响。以烟粉虱2龄若虫作为生物测定对象,研究玫烟色棒束孢对烟粉虱第1、3、5代若虫存活率的影响。结果表明:玫烟色棒束孢对不同世代烟粉虱若虫的致死作用差异不显著;与玫烟色棒束孢野生菌株相比,相同浓度的几丁质酶基因敲除型和表皮蛋白酶基因敲除型菌株对烟粉虱2龄若虫的致死作用显著降低。用浓度为0、1.0×104和1.0×107孢子/m L的玫烟色棒束孢处理烟粉虱第1、3、5代的2龄若虫,在104和107处理区第1、3、5代若虫的存活率分别为51.0%、54.3%、59.4%和39.3%、41.7%、44.6%;几丁质酶基因敲除型菌株处理烟粉虱的2龄若虫后,104和107处理区烟粉虱若虫的存活率分别为67.1%、60.8%,表皮蛋白酶基因敲除型菌株处理后104和107处理区烟粉虱若虫的存活率分别为75.4%、67.1%。(2)玫烟色棒束孢对烟粉虱若虫体内4种酶活力的影响。玫烟色棒束孢野生菌和S22菌处理烟粉虱2龄若虫后,烟粉虱若虫体内酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活力出现明显变化。在玫烟色棒束孢处理区,烟粉虱体内4种酶活力随着时间的延长先升高后降低,在36~60h达到峰值,1.0×107孢子/m L处理区4种酶活的峰值分别为PO1.3U/(g*min)、SOD 33.5U/mg、POD 164.3 U/(g*min)、CAT 80.5 U/(g*min)。在S22菌处理区,烟粉虱若虫体内酚氧化酶(PO)和过氧化物酶(POD)的活力与0孢子/m L处理区基本一致。(3)玫烟色棒束孢对烟粉虱生殖的影响。以烟粉虱2龄若虫为生物测定对象,研究了玫烟色棒束孢对烟粉虱成虫产卵量的影响,结果表明:经玫烟色棒束孢处理后,不同世代烟粉虱的产卵量差异不显著;与玫烟色棒束孢野生菌相比,相同浓度的几丁质酶基因敲除型和表皮蛋白酶基因敲除型菌对烟粉虱产卵量的影响显著降低。用浓度为1.0×104和1.0×107孢子/m L的玫烟色棒束孢处理烟粉虱第1、3、5代2龄若虫后,与0孢子/m L处理区相比104和107处理区第1、3、5代新羽化成虫的产卵量分别下降了58.5%、53.4%、51.3%和89.7%,85.4%、84.0%。104和107处理区第1、3、5代成虫卵巢的感菌率分别为66.7%、33.3%、14.3%和75.0%、50.0%、20.0%。几丁质酶基因敲除型菌处理烟粉虱2龄若虫后,与0孢子/m L处理区相比104和107处理区成虫产卵量分别下降了52.1%、70.4%;表皮蛋白酶基因敲除型菌处理烟粉虱2龄若虫后,与0孢子/m L处理区相比104和107处理区成虫的产卵量分别下降了48.1%、68.7%。(4)玫烟色棒束孢对烟粉虱生殖系统的影响。玫烟色棒束孢处理烟粉虱第1、3、5代的2龄若虫后,解剖新羽化成虫的卵巢可观察到烟粉虱的卵巢发生了不同程度的畸变,卵巢管的数量和成熟卵子的数量显著降低。与0孢子/m L处理区成虫相比,1.0×104孢子/m L和1.0×107孢子/m L处理区新羽化成虫的卵巢管数量分别减少了30~45%和40~55%,成熟卵子的数量减少了45~65%和55~75%。玫烟色棒束孢菌丝和毒素粗提物处理烟粉虱的离体卵巢、脂肪体,42h后可观察到菌丝侵入并且密集地穿插于烟粉虱的脂肪体、卵黄蛋白和卵子中,加入毒素粗提物6h后可观察到油状脂肪体开始消解,成熟卵子出现皱缩,卵黄蛋白结构变疏松,继而部分降解,24h后降解现象明显。