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氨甲蝶呤（MTX）是一种重要的常用化疗药物，然而由于肿瘤细胞对其耐药性的增强而经常导致其疗效大大降低。为了寻找并鉴定与MTX耐药性相关的蛋白质从而为进一步闸明MTX的耐药机制提供线索，培养来源于小鼠NIH3T3的小鼠胚胎成纤维细胞系3T3R500与其耐300μmol／L MTX的细胞系MTX300，提取上述两种细胞系的总蛋白质，双向凝胶电泳分离蛋白质组成分，扫描并通过软件分析考马斯亮蓝染色的2-DE凝胶，选取表达差异最显著的点，胶内酶切后MALDI-TOF-MS进行肽指纹图谱（PMF）鉴定。图像分析显示，