【摘 要】
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miR-122(Micro RNA-122)是在肝脏中高表达的mi RNA,在肝脏的生长发育和脂类代谢等过程发挥重要作用,BZW2(basic leucine zipper and W2 domains 2)主要参与蛋白质合成代谢,本
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.31272438和No.31472091);江苏省自然科学基金(No.BK20151257);苏州市科技计划项目(No.SYN201516)
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miR-122(Micro RNA-122)是在肝脏中高表达的mi RNA,在肝脏的生长发育和脂类代谢等过程发挥重要作用,BZW2(basic leucine zipper and W2 domains 2)主要参与蛋白质合成代谢,本研究目的是确定BZW2是否为mi R-122调控的靶基因。通过生物信息学预测mi R-122的靶基因,并分析BZW2的3-UTR区域与mi R-122种子区的配对情况,再用双荧光素酶报告系统和突变实验证明mi R-122作用于BZW2的3’UTR。用荧光定量PCR检测转染mi RNA-122mimic的鸡(Gallus gallus)肝癌细胞系(leghorn hepatocellar,LMH)细胞和转染LNA-antimi R-122的鸡原代肝细胞中BZW2的表达。鸡BZW2的3’-UTR区域与mi R-122种子区互补配对,荧光素酶报告基因和突变实验分析表明,mi R-122能够通过与BZW2 3’-UTR区结合抑制基因的表达;将mi R-122在LMH细胞中过表达后,发现BZW2 m RNA表达水平显著下降;利用LNAantimi R-122抑制鸡肝脏原代细胞中的mi R-122后,BZW2 m RNA表达水平呈显著性上升。结果证明BZW2是mi R-122的靶基因,其在m RNA水平上受到mi R-122的负性调控,本研究为揭示mi R-122在鸡肝脏中的广泛的功能提供了理论依据。
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