【摘 要】
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以草甘膦抗性基因Epsps为标记基因,在原核Kanr基因两侧引入Cre(环化重组酶)基因识别的Lox-P位点,同时以编码花青素合成转录因子的Bi和Cl基因为可视化选择报告基因,构建了Bt杀
【机 构】
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北京市农林科学院,北京农业生物技术研究中心,首都师范大学生命科学学院,
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以草甘膦抗性基因Epsps为标记基因,在原核Kanr基因两侧引入Cre(环化重组酶)基因识别的Lox-P位点,同时以编码花青素合成转录因子的Bi和Cl基因为可视化选择报告基因,构建了Bt杀虫蛋白基因Cry1Ab/c的可视化跟踪表达载体pBAC9017。用PDS1000/He基因枪转化玉米(Zea mays)自交系501的幼胚和胚性愈伤组织,获得147个草甘膦抗性的玉米再生植株。其中106棵植株获得了结实种子,16棵植株的结实种子有紫红色花青素基因的表达。经PCR检测表明,外源Cry1Ab/c基因已经整合到玉米的基因组中。转基因植株种子蛋白粗提物用BT-Cry1Ab/1Ac金标免疫检测试纸条和ELISA检测,结果表明,Cry1Ab/c在部分转基因植株后代中表达。
The glypican-resistant gene Epsps was used as a marker gene to introduce the Lox-P site recognized by Cre (cyclase) gene on both sides of the prokaryotic Kanr gene. Meanwhile, the Bi and Cl genes encoding the anthocyanin synthesis transcription factor were The reporter gene was visualized and the visualized expression vector pBAC9017 of Bt insecticidal protein Cry1Ab / c was constructed. A total of 147 glyphosate-tolerant maize plants were obtained from immature embryos and embryogenic calli of Zea mays inbred line 501 by using the PDS1000 / He gene gun. Among them, 106 plants obtained strong seeds, and the strong seeds of 16 plants showed the expression of magenta anthocyanin genes. PCR analysis showed that the exogenous Cry1Ab / c gene has been integrated into the genome of maize. The crude extracts of transgenic plants were detected by BT-Cry1Ab / 1Ac gold immunoblot and ELISA. The results showed that Cry1Ab / c was expressed in some transgenic plants.
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