【摘 要】
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复合益生菌产品的菌种组成与活菌数是产品质量的关键，该研究以2种市售复合益生菌固体饮料及其添加的5种（6株）益生菌为研究对象，采用宏基因组测序分析方法及平均核苷酸一致性（average nucleotide identity, ANI）在种水平上精确鉴定产品的菌种组成；通过筛选菌种特异性引物，优化叠氮溴化丙锭-荧光定量PCR （propidium monoazide-quantitative PCR
【基金项目】
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汤臣倍健营养科学研究基金项目（TY0191105）；
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复合益生菌产品的菌种组成与活菌数是产品质量的关键，该研究以2种市售复合益生菌固体饮料及其添加的5种（6株）益生菌为研究对象，采用宏基因组测序分析方法及平均核苷酸一致性（average nucleotide identity, ANI）在种水平上精确鉴定产品的菌种组成；通过筛选菌种特异性引物，优化叠氮溴化丙锭-荧光定量PCR （propidium monoazide-quantitative PCR,PMA-qPCR）方法参数，快速定量产品中每种益生菌的活菌数。结果表明，产品1宏基因组数据分箱获得的4个bins分别被鉴定为动物双歧杆菌乳亚种、鼠李糖乳杆菌、发酵乳杆菌和短双歧杆菌，PMA-qPCR定量检测其活菌数分别为4.86×10~9、4.33×10~9、3.95×10~8和6.38×10~6 CFU/g;产品2宏基因组数据分箱获得的4个bins分别被鉴定为鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、发酵乳杆菌、动物双歧杆菌乳亚种，PMA-qPCR定量检测其活菌数分别为3.12×10~9、1.53×10~9、9.36×10~8和4.16×10~8 CFU/g。PMA-qPCR方法定量2种产品乳酸菌的活菌总数与平板菌落计数结果相比，差异不显著（P>0.05）;该研究在菌种水平上精确鉴定的产品微生物组成与产品声称一致。除短双歧杆菌外，其他5种菌的活菌数检测结果与实际添加量基本吻合。该研究在实现精确鉴定产品物种组成的同时，快速、特异、准确的定量了产品中每种乳酸菌的活菌数，为复合益生菌产品的质量控制提供了技术支持。
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