羧基改性多孔磁性壳聚糖微球共固定化葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶

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壳聚糖分子链上的活性基团数量有限,为了进一步增加壳聚糖的载酶量及固定化酶的生物催化稳定性,以3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)和戊二酸酐(GA)为表面修饰剂,制备得到新型羧基功能化多孔磁性壳聚糖微球(carboxyl modified porous magnetic chitosan microspheres, PMCSM-COOH),成功共固定化了葡萄糖氧化酶(glucose oxidase, GOD)与过氧化氢酶(catalase, CAT)。研究表明,在PMCSM-COOH/GOD/CAT质量比为100/9.34/10.78时,GOD相对酶活达到最高为131.91%±0.58%。与游离酶相比,共固定化酶的温度稳定性、酸碱稳定性与储藏稳定性均有所提升,与底物的亲和力也有所增强,重复使用10次后仍保留着较高的相对酶活,为79.16%±1.98%。游离酶与固定化酶二级结构表明,固定化酶的α-螺旋相对含量高于游离GOD,这使得固定化酶具有更好的刚性结构,其稳定性优于游离酶。
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