基于滚环扩增合成的多价适配体快速检测浆膜腔积液中肿瘤细胞的实验研究

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kevinchen12344
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目的 基于多价适配体构建一种简单快速的肿瘤细胞的检测方法.方法 通过滚环扩增反应形成多价适配体的长链支架(含重复的Poly T),与靶向核仁素的AS1411适配体荧光信号链(带有Ploy A)杂交后,构建多价适配体识别探针Multi-AS1411-LS,并对其进行表征.用流式细胞和共聚焦显微镜分析Multi-AS1411-LS探针对肿瘤细胞识别的可行性,并进一步对识别条件进行了优化,最后对临床浆膜腔积液标本中的肿瘤细胞进行检测,评价其特异性和敏感性.结果 构建的多价适配体识别探针在室温下5 min即可识别肿瘤细胞,比单价的AS1411适配体识别肿瘤细胞的荧光强度高100倍左右,且最低检测限为3个细胞.该多价适配体识别探针在临床标本肿瘤细胞检测中,能很好地区分良恶性细胞,敏感度为87.80%,特异性为93.10%.结论 基于滚环扩增合成的多价适配体能快速检测浆膜腔积液中肿瘤细胞,操作方法简单,有较好的特异性和敏感度.
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