【摘 要】
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目的 分析METTL3介导IGF2BP3 m6A修饰对儿童肝母细胞瘤细胞增殖、迁移的影响，为临床治疗应用提供依据。方法 采用q RT-PCR检测小儿肝母细胞瘤HuH-6中METTL3和IGF2BP3 mRNA的表达；Western blot检测METTL3和IGF2BP3蛋白表达。通过慢病毒转染，在HuH-6细胞中敲低METTL3，并通过免疫印迹验证METTL3蛋白表达，采用qRT-PCR与Wes
【机 构】
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郑州大学第一附属医院儿童重症监护室
【基金项目】
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河南省卫生健康委员会基金项目（编号：LHGJ20200354）；
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目的 分析METTL3介导IGF2BP3 m6A修饰对儿童肝母细胞瘤细胞增殖、迁移的影响，为临床治疗应用提供依据。方法 采用q RT-PCR检测小儿肝母细胞瘤HuH-6中METTL3和IGF2BP3 mRNA的表达；Western blot检测METTL3和IGF2BP3蛋白表达。通过慢病毒转染，在HuH-6细胞中敲低METTL3，并通过免疫印迹验证METTL3蛋白表达，采用qRT-PCR与Western blot检测IGF2BP3的表达，m6A甲基化RNA免疫沉淀技术分析IGF2BP3 mRNA m6A修饰的情况；CCK-8和Transwell小室实验检测细胞增殖和迁移能力。结果 采用METTL3 sgRNA干预后会显著降低细胞METTL3表达水平（P ＜0.05）;sgRNA组细胞48 h和72 h时细胞增殖水平明显低于空载体组（P ＜0.05）;sgRNA组细胞24 h和48 h时细胞迁移明显低于空载体组，sgRNA组细胞侵袭水平明显低于空载体组；sgRNA组细胞中IGF2BP3蛋白及mRNA表达水平明显低于空载体组，且差异均有统计学意义（P ＜0.05）;sgRNA组细胞中m6A-IP及IGF2BP3 m6A相对表达量明显低于空载体组，且差异均有统计学意义（P ＜0.05）。结论 METTL3可有效调节IGF2BP3 m6A修饰并对儿童肝母细胞瘤细胞增殖、迁移进行调控。
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