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目的：90％的胰腺癌患者在诊断后1年内死亡，5年生存率仅为1％～3％。虽然以手术为主的综合治疗可延长生存率，但是5年生存率仍较低，约为4％，即使行根治性切除术，80％的患者2年内出现复发。其预后不良的原因主要是转移。研究发现，这与肿瘤患者早期出现微转移有关，患者在被确诊为肿瘤时，肿瘤细胞已经自原发灶脱落在血液，淋巴结，骨髓等部位，且播散于血液中的外周循环肿瘤细胞所形成的微转移是形成转移灶的第一步。由于采用常规检测方法(如HE染色)常常检测不到微转移，所以应用敏感度及特异度较高的纳米免疫磁珠及RT-nest-PCR方法，检测胰腺癌患者外周血是否表达h-TERT、CK20、CEA、c-met这四种上皮性肿瘤标志物，确定患者微转移是否存在，并应用统计学分析这四种标志物表达率的临床意义。
方法：联合应用纳米免疫磁珠及RT-nest-PCR方法检测人胰腺癌外周血微转移模型的h-TERT、CK20、CEA、c-met表达来确定微转移存在与否，以此评估此方法的敏感度及特异度。检测胰腺癌患者外周血c-met、h-TERT、CK20、CEA这四种基因表达，比较不同肿瘤分期之间的胰腺癌患者对这四种基因表达率，筛选出检测胰腺癌患者外周血循环微转移敏感度及特异度较高的标志物。
结果：纳米免疫磁珠联合RT-nest-PCR法敏感度可以达到：平均1×107个外周血单个有核细胞可以检测到1个肿瘤细胞。胰腺癌组c-met、h-TERT、CK20、CEA四种基因表达率分别为80％(20/25)、100％(25/25)、84％(21/25)、80％(20/25)，而良性疾病对照组c-met、h-TERT、CK20、CEA四种基因表达率为0％(0/15)、0％(0/15)、6.77％(1/15)、0％(0/15)，两组的阳性率差异具有统计学意义(P＜0.05)。c-met、h-TERT、CK20、CEA阳性表达率与性别、年龄、肿瘤大小、血清CA-199及CEA之间均无明显关系(P＞0.05)。c-met、CK20、CEA阳性表达率与肿瘤分期有密切关系(P＜0.05)。CK20阳性表达率与淋巴结转移有密切关系(P＜0.05)。联合c-met、h-TERT、CK20、CEA四种基因微转移检测率达到100％。
结论：
1.免疫磁珠联合RT-nest-PCR法是一种特异度及敏感度均较高的微转移检测方法，h-TERT及CEA在检测胰腺癌患者外周循环微转移的敏感度高于c-met及CK20的敏感度。h-TERT、CEA、c-met特异性高于CK20。2.胰腺癌患者病期越晚，其外周血c-met、CK20、CEA阳性表达率越高。淋巴结转移率越高，外周血CK20阳性表达率越高。3.联合检测h-TERT、CK20、CEA、c-met四种基因，微转移检测率可以提高到100％。