目的:通过对大连地区2014年耐高水平氨基糖苷类抗生素的肠球菌(HLAR)在临床的检出率、对抗生素耐药情况及其耐药基因的临床分布特点进行分析,为临床预防和治疗肠球菌感染及后续相关研究提供事实依据。方法:收集2014年1月-2014年12月大连医科大学附属第一医院患者标本中分离出的致病性肠球菌,根据临床药敏结果筛选出HLAR菌株并采用-80℃低温冷冻的方法保存。使用LIS系统中的微生物统计软件和WHONET 5.6软件对检测到的HLAR菌的临床分布情况和对各类抗生素的耐药情况等进行统计分析。取出低温保存的菌种,复苏后的细菌用溶菌酶处理破坏其细胞壁,使用细菌基因组提取试剂盒提取出HLAR肠球菌中的遗传物质DNA,再利用聚合酶链式反应和琼脂糖凝胶电泳法检测三种常见的氨基糖苷类修饰酶基因:aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)2Ⅲ和ant(6)。检测结果使用Spss17.0统计软件进行分析。结果:2014年从临床共分离到171株致病肠球菌(无重复株),从中筛选出101株HLAR菌株,包括64株屎肠球菌,33株粪肠球菌,2株鸟肠球菌,1株鹑鸡肠球菌,1株棉籽糖肠球菌。检测到的101株HLAR肠球菌分布于临床多个科室,其中重症医学科分离到的菌株明显多于其他科室;从标本来源上看,尿液标本中分离到的菌株最多,其次为血液标本,此外各种分泌物标本及胆汁、腹水和脓汁等标本中也均检测出HLAR肠球菌。分析101株HLAR肠球菌的耐药特性发现:不同种肠球菌其耐药特性存在差异。屎肠球菌为实验中检出率最高的肠球菌,它的耐药情况最为严峻,对红霉素耐药率高达95.31%,而对环丙沙星、左旋氧氟沙星和氨苄青霉素等常用抗生素的耐药率均大于90%。对于上述四种抗生素,粪肠球菌的耐药情况明显好于屎肠球菌,但其对喹努普汀/达福普汀天然耐药,对四环素耐药率也达到87.87%。两种肠球菌对常用几种抗生素的耐药率明显不同,经χ2检验其差别具有统计学意义,P<0.05。实验中的101株HLAR肠球菌对利奈唑胺和达托霉素两种抗生素均为敏感,但检测到3株耐万古霉素肠球菌,除1株鹑鸡肠球菌对万古霉素天然耐药外,另2株均为屎肠球菌。屎肠球菌aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)2Ⅲ、ant(6)三种耐药基因的检出率分别为87.50%,37.5%和40.6%。粪肠球菌三种基因的检出率分别为81.82%,24.24%和27.27%,鸟肠球菌等其他种肠球菌未检测到耐药基因。实验也未检测到同时具有三种耐药基因的肠球菌。101株菌株中,aac(6′)/aph(2″)基因的检出率最高。结论:临床HLAR肠球菌感染率较高,多来源于ICU病房和侵入性操作较多的科室。不同种肠球菌耐药特性不同,屎肠球菌为临床主要流行的肠球菌种,其耐药情况最为严峻。aac(6′)/aph(2″)耐药基因的检出率最高,是大连地区引起HLAR肠球菌的主要耐药基因型。