基于纳米磁珠和Real time RT-PCR技术检测葡萄类病毒

来源 :中国植物病理学会2011年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangyingadvance
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本研究首次建立了应用纳米磁珠提取葡萄类病毒RNA进行实时荧光RT-PCR检测的新方法。以智利提子、北京市场市售的提子和马奶子葡萄果实作为检测对象,用纳米磁珠技术提取类病毒cRNA为模板,进行实时荧光RT-PCR检测,并对PCR产物进行序列分析。结果表明智利和国内市售的提子上携带HSVd、GYSVd-1和GYSVd-2,而马奶子葡萄携带HSVd和GYSVd-1。分别提取果实的果皮、果肉和种子cRNA进行检测,发现果皮的类病毒含量最高,而果肉含量较低,这可能是果肉糖分含量高,影响cRNA提取质量。采集美国的赤霞珠葡萄叶片、中国科学院植物研究所葡萄园的葡萄叶片和北京香山野生葡萄叶片进行检测,结果表明美国赤霞珠携带HSVd和GYSVd-1,而其他两处的葡萄携带HSVd、GYSVd-1和GYSVd-2。携带3种葡萄类病毒的果实和叶片外观没有典型的症状特征,植株长势良好。葡萄上的类病毒种类比较多,李世坊实验室从新疆的150年树龄的葡萄叶片上检出AGVd、HSVd、GYSVd-1和GYSVd-2四种葡萄类病毒。美国Wolpert等认为在葡萄上多种类病毒混合侵染的现象是普遍的,许多品种被一种或者多种类病毒侵染,但是产量和品质没有明显的影响。检测结果进一步确认葡萄上存在多种植物类病毒复合侵染问题。
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