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背景和目的大肠癌,分为结肠癌和直肠癌,是全世界范围内最常见的消化道恶性肿瘤之一,其发病率仅次于肺癌和乳腺癌,位居全世界所有恶性肿瘤的第三位,死亡率也高居第五位,多数大肠癌患者临床发现时已属于中晚期,因此,发现大肠癌新的早期诊断和预后相关指标,深入研究大肠癌发生发展的分子机制,从而提高临床对大肠癌的诊治水平成为当前大肠癌的研究热点。人端粒酶逆转录酶(hTERT,human telomerase reverse transcriptase)是端粒酶活性的限速因子。在诸多的研究中已经表明,hTERT的高表达和肿瘤不良预后密切相关,因此可以作为肿瘤良恶性的鉴别诊断指标。通用转录因子 3C1(GTF3C1,General transcript factor 3C1)是参与 RNA聚合酶Ⅲ转录过程的辅助因子GTF3C的主要组成部分。有研究提示,在肿瘤细胞中,非编码RNA(ncRNA)的表达水平与正常细胞有显著差异,提示GTF3C1可能参与了肿瘤的演生。实验组前期通过一系列实验方法,发现hTERT和GTF3C1之间可能存在着相关关系。然而,目前尚无有关二者之间联系的研究。本实验通过对154例大肠癌患者的肿瘤组织样本,进行免疫组化研究,并且探索了二者与大肠癌的临床病理参数之间的关系,为探索大肠癌发生发展的分子机制,患者预后分析判定以及靶向药物研发提供启示。材料方法1、选择辽宁省肿瘤医院2003年3月至2008年11月,接受大肠癌根治术的154例临床病理参数及预后资料完整的组织标本。由辽宁省肿瘤医院采用门诊及电话随访结合的方式对本组研究对象进行跟踪随访。随访内容包括肿瘤标志物、胸片、盆/腹腔CT或MRI、肠镜、总生存时间(OS,overall survival)等。以患者接受结肠癌根治术的手术时间作为术后生存起始时间,末次随访时间为2012年4月1日,所有患者均完成生存随访,中位生存期24.7个月。2、采用免疫组化 S-P 法(strept avidin-biot in immunostaining)检测大肠癌石蜡切片中hTERT和GTF3C1的表达及其分布特点。应用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件,半定量分析hTERT和GTF3C1的表达,取其图像的光密度平均值(OD值)代表目的蛋白的表达程度。3、应用统计分析软件SPSS 17.0进行统计分析。采用X2检验及连续性校正X2检验比较大肠癌组织和癌旁组织中hTERT、GTF3C1表达水平以及二者与大肠癌临床病理参数之间的关系。采用Spearman法分析大肠癌组织中hTERT与GTF3C1表达的相关关系。采用Kaplan-Meier法及LogRank检验进行生存分析。采用Cox逐步回归模型进行多因素生存分析。以α=0.05为检验性水准,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果1、染色结果示,154例人大肠癌组织中,hTERT低表达者33例(21.4%,33/154),高表达例数121例(78.6%,121/154),62例癌旁组织中,hTERT低表达者53例(85.5%,53/62),高表达者9例(14.5%,9/62)。hTERT在大肠癌组织中的高表达率显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(78.6%vs 14.5%,P=0.000<0.05)。但是,hTERT在大肠癌患者中表达的高低与其他临床病理参数均无相关性,即差异不具有统计学意义(P>0.05)2、染色结果示,154例大肠癌组织中,GTF3C1低表达者85例(55.2%,85/154),高表达者69例(44.8%,69/154),62例癌旁组织中,GTF3C1低表达者51例(82.3%,51/62),高表达者11例(17.7%,11/62)。GTF3C1在大肠癌组织中的高表达率显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(44.8%vs 17.7%,P=0.000<0.05)。但是,GTF3C1在大肠癌患者中表达的高低与其他临床病理参数均无相关性,即差异不具有统计学意义(P>0.05)。3.在154例人大肠癌组织中hTERT与GTF3C1的表达呈正相关,P=0.014<0.05,相关系数为0.198。4、Kaplan-Meier单因素生存分析显示,hTERT高表达的患者的生存期显著短于低表达患者(23.700±2.369 月 vs 32.700±13.781 月,X2=8.876,P=0.003<0.05);GTF3C1高表达患者的生存期显著短于低表达患者(23.000±2.254月vs 27.000±4.302月,X2=8.898,P=0.003<0.05);二者同时高表达患者的生存期显著短于二者同时低表达患者(24.600±2.193月vs 46.700±4.838月,X2=19.818,P=0.000<0.05)。5、Cox多因素回归分析结果显示,hTERT、肿瘤的分期和淋巴结转移为影响大肠癌患者预后生存时间的独立危险因素,GTF3C1不是影响大肠癌患者预后生存时间的独立危险因素。结论hTERT的表达可能与大肠癌患者的发生及预后有关,是影响大肠癌预后的独立危险因素;GTF3C1可以影响患者的生存时间,但不是影响大肠癌预后的独立危险因素;hTERT与GTF3C1在大肠癌中的表达呈正相关。