社会隔离应激引起认知功能障碍小鼠脑内5-HT2C受体及ADAR1表达的改变

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xieke594112
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研究背景和目的应激的研究对于人类生活发展起到重要作用。大量文献表明,人类普遍流行的所有疾病中,很多疾病与应激机制的激活有关。所谓应激是机体在各种内外环境因素及社会和心理因素刺激时所出现的全身性非特异性适应反应,又称为应激反应。所以,应激是一切生物普遍存在的现象,是生物的本能。应激刺激与人类健康息息相关,心理社会应激是社会因素损害人类健康的一条重要途径。应激与疾病的关系一直是研究热点。社会隔离作为一种慢性应激刺激,是指个体的人际关系部分或全部缺失,属于社会应激。本研究制备社会隔离应激刺激动物模型,研究社会隔离应激刺激导致认知功能障碍小鼠脑内5-HT2C受体及ADAR1表达的改变,通过行为学检测实验动物认知功能的改变,采用形态学、生物化学和分子生物学技术检测脑内5-HT2C受体及ADAR1在实验动物相关脑区表达的改变,探讨社会隔离引起认知功能障碍的相关机制,为揭示社会隔离引起的相关精神障碍疾病的发病机制、早期诊断和防治策略提供依据。实验方法选取健康昆明小鼠,按照随机化分组,分别于出生后21天,单笼饲养2周、4周和8周后,采用行为学检测,隔离2周恢复群居组直至成年后采用行为学检测。对应的相同月龄的正常饲养小鼠作为对照组。采用物体定位、物体识别和自发选择性实验评估小鼠空间和非空间认知功能及工作记忆的改变。采用免疫组化实验和免疫蛋白印迹实验检测小鼠脑内5-HT2C受体和ADAR1表达的改变。实验结果1、物体定位实验结果显示,实验小鼠与同龄未隔离对照组相比,隔离2、4和8周组辨别指数明显降低,恢复群居组与对照4周组比无明显差异;2、物体识别实验结果显示,实验小鼠与同龄未隔离对照组相比,隔离2、4和8周组辨别指数明显降低,恢复群居组与对照4周组比无明显差异;3、T迷宫实验结果显示,隔离2周组与同龄未隔离对照组相比,自发选择性变换次数明显降低,隔离4周组选择变换次数第2天明显高于对照组,隔离8周组自发选择性变换次数第4天明显高于对照组,恢复群居组自发选择性变换次数与对照4周组没有明显差异;4、免疫组化实验结果显示,与同龄未隔离对照组相比,社会隔离2、4和8周组海马和额叶皮层的ADAR1免疫反应活性明显增强;隔离2、4和8周组额叶皮层ADAR1免疫反应阳性神经元数目明显增多;隔离2周和8周组在海马CA1区和海马门区免疫反应阳性神经元数目明显增多;隔离2、4和8周组在额叶皮层免疫反应阳性神经元光密度值明显升高;隔离2周和8周组在海马CA1区和海马门区的免疫反应阳性神经元光密度值明显升高,恢复群居组与隔离4周组相比,ADAR1免疫反应活性明显降低;5、Western blot结果显示,与同龄未隔离对照组相比,社会隔离2、4和8周组额叶皮层和海马区的ADAR1蛋白表达明显增多,社会隔离2周和8周组海马的5-HT2C受体的蛋白表达明显增多,社会隔离4周和8周组额叶皮层5-HT2C受体的蛋白表达明显增多。恢复群居组与隔离4周组相比,ADAR1免疫反应活性明显降低。结论1、不同程度的社会隔离应激刺激可引起实验小鼠的空间和非空间认知能力降低;2、不同程度的社会隔离应激刺激可引起实验小鼠工作记忆异常;3、不同程度社会隔离引起实验小鼠的海马和额叶皮层5-HT2C受体和ADAR1表达出现异常;4、恢复群居组缓解了由社会隔离应激刺激引起的异常的空间和非空间认知功能、工作记忆及5-HT2C和ADAR1表达的异常改变。
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