大鼠弥漫性轴索损伤脑干NF68表达与磁共振弥散张量成像研究

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目的:探讨大鼠脑弥漫性轴索损伤( DAI )后神经纤维丝蛋白NF68表达与磁共振弥散张量成像参数值变化的相关性。从分子病理学方面检验DAI后影像学检查的准确性及科学性,以明确磁共振尤其是DTI在DAI的临床诊断、预后评估中的价值。材料与方法:将42只SD大鼠随机均分为对照组及损伤组(用marmarou自由落体装置制作成大鼠脑DAI模型),使用GE1.5T磁共振扫描仪在伤后3h、6h、12h、24h、72h不同时间点行常规头部MRI、DTI扫描。扫描后大鼠在10%水合氯醛腹腔麻醉下迅速断头取脑,经固定、脱水、透明、石蜡包埋等处理,经脑矢状位切片(5μm),选脑干部位,予光镜定位。分别行HE染色、Gless嗜银染色及用anti-Neurofilament 68 NF68 antibody免疫组化染色。对照组7只大鼠,不进行头部重物打击,其余实验步骤同实验组。比较DTI结果与病理学检查结果。结果:正常对照组在T1WI、T2WI各方位成像上未见明显异常信号。而损伤组在T1WI、T2WI各方位成像上除了局部脑肿胀外,有少数大鼠出现脑出血影像学表现。DTI扫描后,与正常对照组相比,损伤组FA测值于伤后3h即开始下降,随后逐渐降低并于72h达最低值;ADC测值于伤后3h开始逐渐升高,于12h达高峰,后逐渐降低并于72h达最低值。病理检查显示,损伤组伤后3h光镜下HE染色及嗜银染色可见脑干轴索出现肿胀,随着时间进展,轴索进一步迂曲成角畸形,部分轴索断裂轴缩球形成。损伤组脑干轴索轴浆NF68染色也逐渐增强,伴随轴索结构的变化, NF68阳性轴索染色强度和数量逐步递增至24h达高峰,随后逐渐降低。统计结果表明,损伤组24h前神经纤维丝NF68的表达与FA值之间存在负相关,r值为-0.494,P <0.01,72h无相关性,P >0.05。损伤组NF68的表达与ADC值之间在伤后12h内存在正相关性,r值为0.504, P <0.01, 24h无相关性,P >0.05, 72h呈正相关,r值为0.393,P =0.01。结论:大鼠DAI早期DTI可检测出常规MRI无法发现的影像学改变,DTI可以在活体水平反映出大鼠DAI后脑干脑水肿及轴索损伤所发生的病理改变,大鼠DAI后神经纤维丝NF68的表达与DTI参数值(FA值与ADC值)之间具有密切的相关性,DTI在DAI的早期诊断、预后判定有重要价值。
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