第1章:引言牙釉质脱矿是正畸治疗过程中亟需解决的问题,预防和控制菌斑附着与聚集是解决问题的关键。预防正畸治疗中牙釉质脱矿是目前研究的热点,虽然已有较多研究,但研究结果仍存在抗菌性不佳、预防脱矿效果不明显及影响正畸托槽粘结强度等问题。本研究受两性釉原蛋白在牙釉质形成过程所起引导作用的启发,在酸蚀牙釉质表面构建两性抗菌肽涂层,如果能稳定结合于酸蚀后的亲水牙釉质表面发挥抗菌作用,同时又能与疏水性粘结剂稳定结合不影响正畸托槽粘结强度,达到减少固定正畸治疗中牙釉质脱矿的目的,将是一种预防和控制牙釉质表面菌斑附着和聚集的新方法。所以,本研究拟在正畸治疗拔除的前磨牙牙釉质表面构建两性抗菌肽D-GL13K涂层,检测涂层抗菌性及抗牙釉质脱矿性,评价抗菌肽涂层在减少正畸过程中牙釉质脱矿的作用,并检测托槽粘结强度。与以往大多研究中将具有抗菌功能的多种成分添加到粘结剂或涂布于正畸托槽表面不同,本研究通过涂层的方法更直接改变牙釉质表面性能,增强其抗菌性和抗渗透性能。研究预期为解决正畸治疗过程中牙釉质脱矿这一正畸临床常见棘手问题开辟新的途径。第2章:牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层的构建目的：为了改变牙釉质表面性能从而减少牙釉质表面细菌附着与聚集,构建牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层,并对其理化性能进行表征。方法：采用p H 9.9的碱性溶液使抗菌肽D-GL13K重组分子三维结构自组装成纳米纤维,使用三种不同浓度抗菌肽D-GL13K、十二种不同预处理方法完成牙釉质表面抗菌肽涂层,室温干燥状态下24小时后,通过水接触角（WCA）、渗透实验等对抗菌肽D-GL13K涂层进行理化性能表征,同时通过唾液水解老化实验及超声振动实验完成涂层的稳定性分析。结果：（1）WCA结果显示酸蚀后天然牙釉质表面显著亲水,随着D-GL13K浓度的增加或添加额外涂层将显著增加牙釉质表面疏水性,但不同方式预处理牙釉质表面脱水对其疏水性无明显影响。（2）渗透实验结果显示D-GL13K涂层具有抗亚甲基蓝渗透作用。（3）唾液水解实验后测试WCA结果显示WCA减小,但涂层后牙釉质仍表现为疏水性,表明D-GL13K具有抗蛋白水解作用。（4）超声振动实验后测试WCA,结果显示WCA减小,同时渗透性增大,但涂层牙釉质表面仍表现为疏水性,且具有抗渗透性,表明D-GL13K具有抗机械降解作用。结论：抗菌肽D-GL13K可以在酸蚀牙釉质表面构建形成具有抗渗透作用的稳定疏水性涂层,涂层方法简单。第3章：抗菌肽D-GL13K牙釉质涂层的细胞相容性目的：评价牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层的细胞相容性。方法：将大鼠成纤维细胞（L929）与抗菌实验组相同的不同浓度及不同涂层方式涂层的牙釉质片共同培养2天,采用CCK-8实验进行细胞增殖定量测定,并通过荧光显微镜对细胞黏附和铺展进行观察。结果：（1）CCK-8检测结果显示不同浓度及不同涂层方式牙釉质表面L929增殖的差异无统计学意义。（2）荧光显微照片显示不同浓度及不同涂层方式下L929均处于健康状态。结论：抗菌肽D-GL13K涂层不影响L929的黏附、铺展与细胞增殖,具有较好的细胞相容性。第4章：牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层的体外抗菌性目的：评价抗菌肽D-GL13K涂层的体外抗菌性,分析不同浓度及不同涂层方式对抗菌肽D-GL13K体外抗菌性的影响。方法：体外静态厌氧培养变形链球菌6小时,采用菌落形成单位分析（CFU）和活/死细菌染色分析,初步评价釉质表面75%酒精脱水后一次涂层5mg/m L的D-GL13K、两次酒精序列脱水后涂层5mg/m L的D-GL13K、两次酒精序列脱水后涂层10mg/m L的D-GL13K及直接涂层10mg/m L的D-GL13K的不同涂层方式对D-GL13K体外抗菌性的影响。结果：（1）牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层组,变形链球菌数量显著减少。（2）牙釉质表面抗菌肽D-GL13K两种不同浓度及四种不同涂层方式对抗菌活性无显著性差异。结论：牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层对口腔致龋菌变形链球菌具有有效的抗菌作用。第5章：牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层的体外抗脱矿性目的：进一步评价抗菌肽D-GL13K涂层的体外抗脱矿性能,分析不同浓度及不同涂层方式对抗菌肽D-GL13K体外抗脱矿性能的影响。方法：牙釉质表面进行D-GL13K涂层,提取含有蛋白酶的无菌唾液在牙釉质涂层表面形成生物膜,与变形链球菌厌氧培养4天,采用光学相干层析成像技术（OCT）和维氏硬度分析,初步评价与抗菌实验组相同的两种不同浓度及四种不同涂层方式对D-GL13K体外抗脱矿性能的影响。结果：（1）牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层组OCT曲线图显示脱矿深度显著减小,同时维氏硬度值增加,说明涂层有体外抗脱矿性能。（2）两种不同浓度及四种不同涂层方式对抗脱矿性能无显著性差异。结论：牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层在口腔致龋环境中具有有效的抗牙釉质脱矿作用。第6章：牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层后托槽粘结强度目的：前期研究表明抗菌肽D-GL13K涂层具有牙釉质表面的抗脱矿性能,本研究将进一步评价抗菌肽D-GL13K涂层对托槽粘结强度的影响。方法：将正畸治疗拔除的前磨牙牙根用环氧树脂包埋,牙冠颊面抗菌肽D-GL13K涂层后使用疏水性粘结剂粘结正畸金属托槽,通过Instron力学测试仪分析与抗菌实验组相同的两种不同浓度及四种不同涂层方式对正畸治疗托槽粘结强度的影响,并通过托槽剥脱后牙釉质表面残余粘结剂指数（ARI）及扫描电镜（SEM）分析涂层后托槽剥脱对牙釉质表面的影响。结果：（1）两种不同浓度及四种不同涂层方式牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层组与对照组间托槽粘结强度无统计学差异。（2）D-GL13K涂层组,牙釉质表面ARI指数显著低于对照组。（3）SEM图像显示涂层可以减少牙釉质表面损伤。结论：牙釉质表面抗菌肽D-GL13K涂层不影响托槽粘结强度,但可以明显减少去除托槽及残余粘结剂造成的牙釉质表面损伤。第7章 结论与展望（1）本研究能将抗菌肽D-GL13K稳定涂层于牙釉质表面,通过体外研究及模拟口腔致龋环境,D-GL13K涂层对变形链球菌表现出抗菌活性及抗脱矿性能,同时具有较好的细胞相容性,临床操作简单,为预防正畸治疗中牙釉质脱矿及损伤提供了新的方法。（2）本研究所构建的抗菌肽D-GL13K涂层不影响正畸金属托槽粘结强度,并满足临床应用需求;剥脱金属托槽后,牙釉质表面残余粘结剂的量明显减少,能够减少因为去除釉质表面残余粘结剂造成的牙釉质损伤,保护牙釉质。本研究还需进一步完成致龋模型动物实验,并模拟口腔环境下,抗菌肽D-GL13K涂层样本的体内长期抗脱矿性能,并从不同种类托槽粘结强度的影响及牙釉质表面损伤分析等方面开展深入研究。在将来的工作中也期望进一步探索这种仿生D-GL13K涂层的再矿化潜力。