釉质靶向抗菌肽的构建及其效应的研究

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目的:通过双磷酸化丝氨酸的结合提高抗菌肽的釉质结合性和抗菌效率。  方法 以双磷酸化丝氨酸与抗菌肽PI(Polyphemusin I)结合构建DPS-PI(Double Phosphorylated Serine-Polyphemusin I),并以固相合成法合成。通过抑菌环直径检测PI和DPS-PI的最低抑菌浓度(MIC)和抗菌效果,用抗菌肽处理釉质后,电镜观察釉质表面形态并检测釉质表面元素含量的差异;用经抗菌肽孵育的釉质处理变形链球菌(S.mutans)并对釉质及其表面的S.mutans培养,通过生长曲线检测和LIVE-DEAD细菌染色剂染色观察PI和DPS-PI的釉质结合性和抗菌效果;通过电镜观察样本釉质表面菌斑生物膜生长情况,检测PI和DPS-PI抗菌肽生物膜的效果;最后以抗菌肽处理兔切牙,通过菌斑染色剂染色观察菌斑生物膜的生长情况,检测PI和DPS-PI的菌斑生物膜抑制效果。  结果 PI和DPS-PI的MIC分别为40μg/ml和80μg/ml,两者的抑菌环直径差异无统计学意义(P>0.05),且两者各抑菌浓度抑菌环直径无统计学差异;经AMP处理的均出现颗粒状结构,DPS-PI处理组釉质表面碳元素(C)和氮元素(N)的含量相对较多;PI和DPS-PI处理的釉质表面处理的细菌生长受到抑制,DPS-PI处理组抑制更明显,差异具有统计学意义(P<0.05);PI和DPS-PI处理组釉质表面菌斑生物膜形成受抑制,DPS-PI处理组菌斑生物膜形成抑制性更明显,DPS-PI处理组兔切牙表面菌斑形成较少。  结论 PI和DPS-PI都具有较好的抗菌效果,双磷酸化丝氨酸的结合增加了PI的釉质结合性并且不改变PI的抗菌效果。DPS-PI还可以增加釉质表面抗菌斑生物膜作用。
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