【摘 要】
：
人乳头瘤病毒（HPV）病毒与多种癌症的发生密切相关,其中HPV E6/E7基因在宫颈病变发生发展中起重要的作用,以其作为检测目标具有重要意义。本文旨在利用一种基于锁式探针（PLP）与滚环扩增（RCA）相结合的原理实现原位检测信号放大的技术优势,设计一种新型HR-HPV E6/E7 mRNA诊断方法,实现在细胞涂片、冰冻或石蜡包埋组织切片上对E6/E7 mRNA进行原位检测。采用荧光和显色两种检测系
论文部分内容阅读
人乳头瘤病毒（HPV）病毒与多种癌症的发生密切相关,其中HPV E6/E7基因在宫颈病变发生发展中起重要的作用,以其作为检测目标具有重要意义。本文旨在利用一种基于锁式探针（PLP）与滚环扩增（RCA）相结合的原理实现原位检测信号放大的技术优势,设计一种新型HR-HPV E6/E7 mRNA诊断方法,实现在细胞涂片、冰冻或石蜡包埋组织切片上对E6/E7 mRNA进行原位检测。采用荧光和显色两种检测系统,进而建立起一个成熟的,可根据不同场景选择相应检测方法的HPV E6/E7 mRNA检测技术平台,并进行疾病的辅助诊断。鉴于HPV型别的丰富性,我们参考文献选择了14种高危HPV（HRHPV）型别设计锁式探针,首先在细胞系上对HPV锁式探针进行筛选和优化,最终选择最优的探针组合,保证检测的效率及特异性。将筛选好的探针组合在宫颈脱落细胞涂片和宫颈组织切片上进行测试,验证了探针的特异性以及可行性。接着利用本方法对14种HPV进行简单的分型,分为HPV 16/18和非HPV 16/18高危型这两类,分别用两种不同的荧光基团对它们进行标记。根据荧光显微镜镜检结果显示,HPV 16/18阳性细胞涂片只检测出HPV 16/18 mRNA E6/E7的信号点;非HPV 16/18阳性样本只检测出非HPV16/18 mRNA E6/E7的信号点;而阴性样本中无信号点检出。对HPV E6,HPV E7,MKI67,CDKN2A这四个基因转录本在宫颈癌前病变组织进行空间定位分析,发现HPV E6和HPV E7呈现强相关性,且不同宫颈病变阶段HPV E7的检出量均高于HPV E6,特别是浅表层弥漫性信号点。MKI67和CDKN2A作为间接指标,它们之间也呈现较强相关性,随着宫颈病变程度的加重,它们的信号检出量也随之增加。最后,应用单分子显色原位杂交法（sm CISH）在宫颈活检样本中检测HR HPV E6/E7 mRNA,并与p16免疫组化（IHC）结果相对比,探讨RNA原位杂交在宫颈病变中的诊断意义。发现随着宫颈病变程度的加重,HR-HPV E6/E7mRNA原位杂交的阳性检出率也逐渐上升,提示HPV E6/E7 mRNA表达水平与病变的严重程度正相关;此外,HR-HPV E6/E7 mRNA原位杂交信号染色模式的不同,对宫颈癌前诊断和分级具有潜在的指导意义。
其他文献
随着我国经济实力的日益增强,汽车行业领域发展势头迅猛,巨大的汽车存量带动了汽车后市场的增长引擎。当前国内的汽车后市场发展仍面临着许多困境,如市场高度分散、施工流程不规范、产业效率低下、交易成本高、消费者对非4S店体系的汽修维保门店的信任度有待进一步提升等。但随着我国汽车行业的发展与壮大,再加上互联网技术的深入渗透,我国汽车后市场的商业模式正在进行迭代升级,行业格局也正在面临变革重构。在国内汽车后市
伴随着“中国制造2025”战略的提出和深入,工业以太网技术已经深入到智能制造领域的任何角落,国内对于工业以太网交换机的需求大幅度增加。本文所研究的BH公司是一家专业从事工业以太网交换机研发和生产的外资企业,成立于1924年,一直是工业交换机领域的领先者和技术的主导者。随着社会经济技术发展,科技水平提高,国产交换机品牌的崛起,BH公司面临同行业的竞争越来越多,工业交换机市场的竞争越来越激烈。本文从政
随着中国特色社会主义的不断推进,我国经济发展突飞猛进,同时我国证券市场也在不断地壮大和完善。上市公司作为证券市场的重要组成部分,其财务信息质量备受关注。许多上市公司为了融资或者避免退市,便会选择通过盈余管理调节利润。盈余管理会导致上市公司财务信息失真,使投资者蒙受损失,同时给上市公司带来严重的经济后果,并且过度的盈余管理行为会严重扰乱我国证券市场的正常经济秩序,不利于我国证券市场健康发展。为此,对
经过五年的飞速发展,Y公司目前已成长为年销售规模最大的医药互联网企业。但由于小B端用户及医药产品的特殊性质,只存在价格维度的对比性,导致平台用户严重缺乏忠诚度,同时由于外部环境竞争激烈,为稳固市场份额公司不得不持续实施高额补贴的策略。一旦补贴停止,平台活跃用户便断崖式下跌,让公司陷入囚徒困境之中。基于上述背景,本文的研究目的主要是为了解决Y公司当前面临的两难抉择,希望通过对其营销策略进行分析来寻求
随着国际竞争形势日益严峻以及新发展观念的提出,我国的许多企业为能够完善战略布局、提升业务多元性,都将目光集中于并购重组这一投资模式。2014年,资本市场的监管层为了顺应市场发展趋势,对并购活动相关的规章制度进行了深度调整,随之,并购交易活动的规模得到了长足的发展。但近年来,市场中的并购活动呈现了“高估值、高承诺、高商誉”的现象,在大多数的并购交易中,业绩承诺都是其核心条款,一方面业绩承诺推高了标的
随着我国经济的持续高速发展和教育事业的壮大,财会培训市场经历了近三十年的发展。为符合产教融合的现实需求,国家也出台实施一系列政策,密集释放出对职业培训的示好信号。RH会计教育公司在财会培训领域耕耘近二十年,立足湖北武汉,目前已是行业翘楚之一。但伴随更多的职业教育培训机构涌入市场,RH公司面临的竞争也越来越大,如何在竞争激烈的环境下拓展用户,占领更多的市场份额,成为了RH公司目前需要解决的问题。本文
随着工业化推进和城市化进程持续性深入,我国环卫行业市场得到迅猛发展。然而传统的环保服务市场,在移动互联网、5G和人工智能的带动下发生翻天覆地的变化。在综合环境管理和治理的过程中,充分利用云数据、物联网等技术手段,推进我国环保服务业的改革性发展,实现环保服务业与科技的深度融合是必然趋势。本文通过查询和阅读大量关于环卫智能管理和智慧环卫相关的文献,系统梳理了我国环卫行业的发展阶段、基本特点及国外环卫智
消费性电子行业属于劳动密集型行业,行业门槛越来越低,竞争趋于白热化。企业的研发能力、成本控制能力、品质监控能力和迅速大规模量产的能力是维持企业永续经营的四大支柱。LX公司作为该行业的典型代表,其项目管理流程和绩效考核体系跟不上公司成长的需要。因此,公司的项目管理流程和绩效考核体系的优化,对企业的可持续发展起着举足轻重的作用。本文以LX公司为例,通过项目团队和职能团队的自我剖析整理出目前项目管理存在
植物精油（essential oil,EO）是从天然植物中提取出的具有挥发性、浓郁香味的脂溶性混合物,对大肠杆菌、腐败希瓦氏菌等常见食源性病原菌具有较好的抑菌效果,且成本低廉,可用于食品保鲜。本研究筛选出安全性高且抑菌效果较好的肉桂醛,随后探究了肉桂醛对腐败希瓦式菌的抑菌机理,之后使用静电纺丝技术制备了包含肉桂醛的聚乙烯醇缩丁醛酯（PVB）保鲜膜并进行表征,最后将保鲜膜应用于大黄鱼的保鲜,得出以下
背景与目的:幽门螺杆菌（Hp）是人类常见的致病菌之一,Hp感染是人类最常见的慢性感染之一,目前全球仍有约50%的人口被感染,我国的感染率与全球水平相当[1]。Hp感染所诱导的机体免疫应答可引起胃黏膜炎症和损伤,是慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌的主要病因[2]。TLR4是巨噬细胞表面重要的模式识别受体,能够识别病原相关分子模式,调节免疫反应。高迁移率蛋白族B1（HMGB1）是新发现的TLR4重要的内源性