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目的:miR-590-5p在多种肿瘤中表达失调,从而影响肿瘤的增殖、侵袭、迁移等生物学行为。阅读文献及前期实验结果表明miR-590-5p与胃癌顺铂耐药具有相关性,但其具体机制尚未明确。本文主要探讨miR-590-5p通过下游靶基因调节人胃腺癌细胞对顺铂敏感性的变化及其具体的分子机制。方法:通过实时荧光定量PCR检测胃腺癌细胞SGC7901、BGC823以及AGS等细胞中miR-590-5p的相对表达量。通过Targetscan等生物信息学软件预测miR-590-5p下游靶基因,并用荧光素酶报告实验验证miR-590-5p与下游靶基因的结合。通过脂质体Lipofectamine 2000将miR-590-5p mimics及miR-590-5p inhibitor分别转染至低表达和高表达miR-590-5p的人胃腺癌细胞,并利用Western blot以及qRT-PCR验证其下游靶基因的表达;流式细胞仪检测转染后细胞在顺铂作用下凋亡情况的变化,MTT检测转染后的胃癌细胞对不同顺铂浓度(0、0.5、1、2、4、8)μmol/L的敏感性变化。此外,为了验证靶基因对其耐药性的影响,通过Western blot验证敲除靶基因后靶基因的相对表达水平;流式细胞仪检测敲除后细胞在顺铂作用下凋亡情况的变化,MTT检测敲除后的胃癌细胞对不同顺铂浓度(0、0.5、1、2、4、8)μmol/L敏感性的改变。结果:实时荧光定量PCR检测结果表明miR-590-5p在SGC7901细胞中表达相对于BGC823细胞较低。生物信息学软件预测到miR-590-5p与PDCD4能够靶向互补,并且荧光素酶实验证实miR-590-5p与野生型PDCD43’UTR结合荧光素酶活性明显减低。Western blot以及qRT-PCR提示,SGC7901细胞和BGC823分别过表达和抑制miR-590-5p后PDCD4的表达相应降低和升高(p<0.05);流式细胞仪表明SGC7901细胞和BGC823分别过表达和抑制miR-590-5p后细胞凋亡相应降低和升高(p<0.05);人胃腺癌细胞SGC7901上调miR-590-5pmimics后较亲本细胞SGC7901对顺铂的敏感性升高,而转染miR-590-5p inhibitor后的BGC823细胞对顺铂敏感性降低(p<0.05)。敲除靶基因PDCD4后,其蛋白表达量降低(p<0.05),流式结果表明胃癌细胞凋亡降低(p<0.05),而MTT结果表明敲除PDCD4后胃癌细胞对顺铂敏感性降低(p<0.05)。结论miR-590-5p可能通过调节下游靶基因PDCD4的表达而影响胃癌细胞对顺铂的敏感性。miR-590-5p下调靶基因PDCD4的表达;PDCD4可能通过促进胃癌细胞的凋亡进而影响胃癌细胞对顺铂的敏感性。