目的 mir-582-5p和mir-590-5p在海洛因成瘾者的外周血单核细胞中表达下降,那么mir-582-5p和mir-590-5p与免疫功能有什么关系呢？本实验目的 是探 讨mir-582-5p和mir-590-5p参与吗啡导致免疫抑制的潜在机制。方法 通过细胞分选,细胞培养,miRNA瞬时转染,生物信息学分析,逆转录反应,荧光素酶活性检测以及统计学分析得到实验结果。结果 与正常对照组相比,吗啡刺激组的miR-582-5p和miR-590-5p表达水平显著降低,并呈明显的时间和浓度依赖性。吗啡刺激人单核细胞后,显著减少了上清TNF-α水平,而增加了上清IL-10的水平。此外,与对照组相比,吗啡刺激显著降低了单核细胞的phospho-NF-κB-p65和NF-κB-p65的蛋白水平,同时发现,NF-κB-p65总蛋白水平并未因miR-582-5p和miR-590-5p的过表达和下调表达而发生变化。这一结果提 示,miR-582-5p和miR-590-5p引起活化的NF-K B-p65水平的增高,具有促进NF-κB-p65活性的作用。结论 我们的实验结果显示了高剂量的吗啡呈时间和浓度依赖趋势减少NF-K B的激活。此外,单核细胞转染mir-582-5p和mir-590-5p的mimic导致TNF-α水平的升高和激活NF-κB,但降低了IL-10水平,这表明mir-582-5p和mir-590-5p具有促炎作用。这些作用也与海洛因成瘾者中mir-582-5p与mir-590-5p和TNF-α与IL-10之间的相关性结果是一致的。吗啡可通过下调mir-582-5p和mir-590-5p,发挥抑制诱导单核细胞炎症应答的作用。此外,增强mir-582-5p和mir-590-5p的表达,可促进单核细胞促炎因子释放,激活NF-κB-p65炎症通路。这些结果为后续药物开发及应用提供了新的靶点和思路。