【摘 要】
：
目的:探究YAP在I型神经纤维瘤病肿瘤组织中的病理学表达及定位,探索通过靶向抑制YAP治疗神经纤维瘤的可行性,为NF1肿瘤性疾病的靶向治疗提供新思路。方法:1.基于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科的相关数据库,筛选2009年1月至2019年12月内经手术切除的I型神经纤维瘤肿瘤组织的病理样本,通过免疫组化染色,对比研究YAP蛋白在正常神经组织和肿瘤组织中的表达水平和定位;2.为进一步研
论文部分内容阅读
目的:探究YAP在I型神经纤维瘤病肿瘤组织中的病理学表达及定位,探索通过靶向抑制YAP治疗神经纤维瘤的可行性,为NF1肿瘤性疾病的靶向治疗提供新思路。方法:1.基于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科的相关数据库,筛选2009年1月至2019年12月内经手术切除的I型神经纤维瘤肿瘤组织的病理样本,通过免疫组化染色,对比研究YAP蛋白在正常神经组织和肿瘤组织中的表达水平和定位;2.为进一步研究NF1基因与YAP表达的相关性,通过慢病毒干扰载体构建NF1基因敲低的施万细胞模型NF1kdRSC96,通过Real-time PCR、Western blot和免疫荧光对该细胞株进行鉴定,同时利用Western blot和激光共聚焦技术,对比NF1基因敲低组和对照组中YAP蛋白的表达和核内聚集变化;3.使用CCK-8法研究YAP抑制剂CA3对NF1kdRSC96增殖的影响;4.构建NF1kdRSC96的荷瘤小鼠模型,研究体内条件下YAP抑制剂对肿瘤生长的影响。结果:1.NF1神经纤维瘤肿瘤组织中YAP呈高表达状态,核内聚集现象加强;2.成功通过慢病毒干扰载体构建NF1基因表达降低的NF1kdRSC96细胞株,该细胞株NF1基因的m RNA表达下调70%,NF1蛋白表达下调65%,RAS总蛋白水平上升,RAS/MAPK通路下游蛋白p-ERK活性增高;相较于对照组,NF1kdRSC96稳转株中YAP蛋白表达明显上调,激光共聚焦显示YAP蛋白入核能力增强,Western blot结果进一步确认细胞核内的YAP蛋白增多;3.YAP抑制剂CA3和MEK1/2抑制剂司美替尼（Selumeitnib）均可抑制NF1kdRSC96细胞株增殖活性,CA3在实验组和对照组中的半抑制浓度分别为0.7063±0.0233μM和0.9583±0.0354μM,具有统计学意义（P<0.05）,而Selumeitnib对实验组和对照组的半抑制浓度分别为57.55±2.43μM和53.98±3.55μM,没有统计学意义;4.荷瘤小鼠的药物实验结果显示,CA3和Selumeitnib均可有效延缓肿瘤的生长,药物毒性可耐受,但两组间肿瘤的大小没有明显差异。研究结论及意义:1.YAP在I型神经纤维瘤病肿瘤组织中表达增高、入核增强;2.靶向抑制NF1相关施万细胞中的YAP,能够抑制肿瘤细胞的生长和细胞增殖;3.此实验结果为NF1的发病机制及靶向治疗研究提供新思路。
其他文献
目的:肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）在肿瘤微环境中扮演者十分重要的角色,豆蛋白酶（legumain）在胃癌中高表达,且与肿瘤微环境关系密切,legumain是否通过调控TAMs影响胃癌的发生发展不甚清楚,本研究的目的是探讨legumain对于TAMs的增殖及迁移的影响,进一步研究legumain能否通过TAMs影响胃癌的发生发展。方法:应用P
SRC作为一个经典的原癌基因,编码具有酪氨酸激酶活性的c-Src蛋白。已经有多篇研究报道,c-Src在多种人类肿瘤中处于高表达状态或具有高激酶活性,并参与到癌症发生发展的多个过程中,包括细胞增殖、分化、血管生成和预后生存率等。AGO2作为miRISC复合物中的核心组分,参与小RNA介导的基因沉默和部分miRNA的生成调控。AGO2可以发生多种翻译后修饰,其中酪氨酸磷酸化修饰的研究尚处于起步阶段,并
目的:在卵巢癌网膜转移动物模型RNAseq测序结果基础上,筛选出在卵巢癌网膜转移过程中强势表达的基因——补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白6（Complement C1q Tumor Necrosis Factor-Related Protein 6 CTRP6）;在体外细胞水平进一步探究CTRP6通过调节网膜脂肪细胞脂代谢促进卵巢癌网膜转移的机制研究。方法:利用GO富集分析卵巢癌网膜多时点动态测序结
胰腺癌是恶性程度最高的肿瘤之一,临床上缺乏有效治疗手段,预后极差。在我国,近年来胰腺癌患者数量呈快速上升趋势,严重威胁到人类健康。它被认为是一种复杂的基因异常疾病。而对于胰腺癌的分子分型的研究有助于我们更好地理解这一种基因异常疾病。Collison于2011年提出了基于表达谱水平的胰腺癌分型标准分为三组。在之后的2016年Bailey等人同样发现Collison的分三组之一的类间质亚组（Baile
肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤,尤其发生转移时,预后不佳。为了更好地理解其发生发展的过程以及分子机制,我们的研究目标是寻找肺癌骨转移相关的核心基因。首先,我们从GEO数据库中下载了GSE76194数据集,比较了4对高骨转移肺癌细胞系及其亲代细胞低转移细胞系之间的表达谱,利用R软件中的Limma软件包进行差异表达基因分析,获得1132差异基因,并以此为基础,构建了差异蛋白质-蛋白质相互作用网络。接着,
目的:运用WGCNA法在透明细胞癌中建立风险预测模型,判断患者的预后风险。同时运用该方法在非透明细胞癌中探究具有预后判断价值的靶点,并对其治疗意义做初步探究。方法:从TCGA官网和GEO数据库下载肾透明细胞癌、乳头状和嫌色细胞癌的m RNA测序数据和对应的临床资料,通过Limma法分析出差异表达基因（DEGs）。在TCGA数据库中,对DEGs进行WGCNA分析,获得共表达基因模块。选取与临床性状相
目的:利用公共数据库筛选胃癌中高表达基因,确定该基因在胃癌细胞系和组织中的转录和翻译表达水平,探讨其对病人临床预后的影响,同时阐述其编码蛋白在胃癌肿瘤微环境中的分子机制,为胃癌的早期临床诊断和靶向干预治疗提供线索和思路。方法:在TCGA数据库中挑选出配对的胃癌组织样本,通过生物信息学方法分析筛选出胃癌中高表达基因CLDN6;在胃癌细胞系中检测不同细胞系CLDN6表达情况,在仁济医院病人组织样本以及
目的:前列腺癌是世界最常见的男性恶性肿瘤之一,也是全球男性癌症相关死亡的一个主要原因。肿瘤耐药性、治愈率低和预后不良是晚期前列腺癌治疗中亟待解决的关键问题,探索新的抗癌药物、治疗方法和机制有助于前列腺癌疗效的改善。本研究旨在探究芳香二胺类药物喷他脒在前列腺癌中的抗癌作用及其作用机制,以期为前列腺癌的治疗提供新的思路与方法。方法:通过CCK-8检测、集落形成实验与细胞周期分析确定喷他脒对前列腺癌细胞
背景:癌症患者发生静脉血栓栓塞（venous thromboembolism,VTE）的风险比普通人群高4-7倍。CASSINI和AVERT试验表明新型口服抗凝药物（novel oral anticoagulants,NOACs）预防癌症相关血栓是有效和安全的。然而,NOACs进行血栓干预是否具有成本-效果尚未清楚。方法:本研究先对基于Khorana评分的VTE相关临床试验进行系统评价和Meta分
背景:三阴性乳腺癌因缺少雌激素受体（estrogen receptor,ER）、孕激素受体（progesterone receptor,PR）和表皮生长因子受体（human epidermal growth factor receptor 2,HER-2）等分子的表达,所以内分泌和靶向药物疗效较差,目前主要的治疗手段为化疗。但三阴性乳腺癌常出现化疗耐药而导致患者预后变差,故对其耐药性的机制研究十分