【摘 要】
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目的:肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）在肿瘤微环境中扮演者十分重要的角色,豆蛋白酶（legumain）在胃癌中高表达,且与肿瘤微环境关系密切,legumain是否通过调控TAMs影响胃癌的发生发展不甚清楚,本研究的目的是探讨legumain对于TAMs的增殖及迁移的影响,进一步研究legumain能否通过TAMs影响胃癌的发生发展。方法:应用P
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目的:肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）在肿瘤微环境中扮演者十分重要的角色,豆蛋白酶（legumain）在胃癌中高表达,且与肿瘤微环境关系密切,legumain是否通过调控TAMs影响胃癌的发生发展不甚清楚,本研究的目的是探讨legumain对于TAMs的增殖及迁移的影响,进一步研究legumain能否通过TAMs影响胃癌的发生发展。方法:应用PMA/IL-4/IL-13体外诱导的方法获得选择性活化TAMs;采用慢病毒介导的基因过表达或敲低技术构建legumain过表达及低表达的稳转细胞系;采用蛋白印迹的方法检测legumain的蛋白表达量;应用CCK-8和Transwell小室实验检测细胞的增殖能力和迁移能力;采用裸小鼠皮下成瘤实验在动物水平验证legumain缺陷的TAMs对胃癌的影响;应用免疫荧光双染和免疫组织化学分别检测肿瘤组织中CD68、legumain、CD31的表达和Ki67的表达。结果:用慢病毒介导的技术构建成功了legumain过表达及低表达的THP-1和Raw264.7细胞系;legumain过表达增强TAMs的细胞增殖和迁移能力,反之legumain敲低表达降低了TAMs的细胞增殖和迁移能力,此外legumain通过TAMs影响了胃癌细胞的体外增殖能力和迁移能力和体内成瘤能力。结论:研究表明legumain可以调控TAMs细胞增殖和迁移能力,而且通过TAMs,legumain可以调控胃癌细胞的体外增殖和侵袭能力,影响肿瘤的体外成瘤和肿瘤的血管新生能力。这些结果表明legumain在TAMs调控胃癌细胞增殖和侵袭的过程中扮演了十分重要的角色,可能作为胃癌治疗的新靶点。
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