神经导向因子Slit家族的成员在神经系统发育中可通过与其受体Robo家族成员相互作用而参与轴突伸展方向的调控。近年来的研究表明,Slit/Robo信号通路在肿瘤组织中也发挥了重要作用。在人体中已发现三个Slit家族成员（Slit1～3）,Slit1主要在神经组织中表达,而Slit2和Slit3则表达广泛,但Slits在肿瘤组织中普遍低表达。目前已证实,在一些细胞中,Slit2/3对其受体之一 Robo1的表达具有负调控作用。我们通过对Oncomine数据库的检索发现,与正常癌旁肝组织相比,肝癌组织中受体Robos的表达显著上调,而Slit3的表达变化情况则不均一,既有上调也有下调。这预示着在肝癌细胞中可能存在不依赖于受体Robos的Slit3作用机制。同时,我们还发现在肝癌细胞系HepG2中Slit3的表达量很低,因此,本论文拟以HepG2细胞为模型,研究Slit3对HepG2细胞的生长、侵袭和迁移等功能的影响,并验证Slit3对这些细胞功能的影响是否依赖受体Robos的作用。我们构建了 Slit3过表达的HepG2细胞系,在此基础上分别敲低Robo1和Robo4基因,发现Slit3在HepG2细胞中过表达会抑制细胞的增殖,迁移和侵袭。在HepG2-Slit3细胞中,Robo1敲低促进细胞的迁移,抑制增殖和侵袭,而Robo4敲低对细胞增殖,迁移能力无显著影响,可抑制侵袭。我们还发现Slit3过表达可促进TIMP1,TIMP2的分泌。在HepG2-Slit3细胞中,Robo1敲低对TIMP1分泌无显著影响,可促进TIMP2的分泌,Robo4敲低则促进TIMP1,TIMP2的分泌。我们以外源Slit3蛋白处理野生型HepG2细胞,发现外源Slit3蛋白可抑制细胞增殖,而对细胞的侵袭能力无显著影响。我们还分别对HepG2-Slit3,HepG2-GFP细胞进行了转录组测序,发现在HepG2-Slit3中共有610个基因表达量显著改变,其中243个下调,367个上调。促进细胞增殖迁移等活动的分子如FGFR2,GLUL,SHROOM2,SORBS2,CYR61等表达量下调,而促进细胞分泌活动的分子如HSP90B1,PPARGCIA等表达上调。为了解Slit3在不同肿瘤细胞中是否存在共同作用机制,我们将转录组测序结果与成纤维肉瘤细胞HT1080-GFP、HT1080-Slit3细胞的转录组结果比对,发现在两种细胞中Slit3过表达导致的差异表达基因种类有较大不同。在HepG2-Slit3中MUC13等基因上调,COLO3A1等基因显著下调,而在HT1080-Slit3中,HYOU1等上调,MTRNR1等下调。但在两种细胞系中,Slit3过表达后,与细胞分泌活动相关的分子如HSP90B1,EVI2B,PPARGCIA等的表达量均上调,这预示着Slit3在这两种细胞中对分泌活动的调控机制有相似之处。因此我们认为Slit3在HepG2细胞中可使促进细胞分泌活动的分子的表达量上调,进而促进TIMPs的分泌,抑制MMPs的作用,最终抑制细胞的侵袭和迁移。同时,Slit3在HepG2细胞中还可影响多种与细胞增殖迁移相关基因的表达,进而抑制HepG2细胞的增殖和迁移。且这些作用不完全依赖于Robo1或Robo4受体。