研究背景随着人口数量的逐年增长及人口老龄化问题的逐年加剧,癌症已经成为威胁当代人群健康和经济发展的主要问题。癌症作为当今最主要的致死性疾病,如何找到切实有效的治疗方法、提高患者的预后已成为目前亟待解决的关键问题之一。在以往的研究中,已经发现肿瘤细胞在发生和发展过程中的多种生物学进程不同于正常细胞,其中一个重要的生物学特点是:在细胞的有丝分裂进程中,肿瘤细胞的调节失控导致其增殖能力显著增强。在细胞周期的有丝分裂过程中,Aurora家族蛋白（AURKA,AURKB and AURKC）发挥着非常重要的作用。研究发现,AURKA作为一种原癌基因,其蛋白表达在多种类型的肿瘤组织中普遍增高,与肿瘤的恶性程度及患者的临床预后有很强的相关性,且在肿瘤的发生发展中起到至关重要的作用,被视为肿瘤靶向治疗的关键靶点。无论在体内实验还是体外实验中,围绕AURKA抑制剂影响肿瘤细胞生长的研究都取得了显著的成果,因此,以AURKA为靶点的抑制剂的研究有望实现临床肿瘤患者靶向治疗的新突破。但是,其药物在临床试验阶段的成果并不十分乐观,部分患者在使用了靶向AURKA的药物后,出现了不同程度的不良反应;此外,也有研究发现,AURKA抑制剂在临床患者体内的靶点特异性较差。因此,如何解决这一类问题成为了解决临床肿瘤治疗的重要科学问题之一。综上,我们试图找出与AURKA发生相互作用的关键蛋白,探索其与AURKA之间的相互作用关系及内在调控机制,为临床肿瘤的靶向治疗提供一种新思路。研究目的本课题基于对现有的数据库的筛选和分析,找出与AURKA发生相互作用的关键蛋白,结合生物学相关实验,对蛋白-蛋白间在细胞内的相互作用进行验证,再进一步探索两个蛋白质之间的内在调控机制,从而为临床肿瘤的靶向治疗提供一种新思路。研究方法（1）运用免疫共沉淀和GST pull down技术证明LIMD1与AURKA之间在细胞内存在相互作用。（2）（1）si RNA技术:通过小干扰片段分别干扰乳腺癌细胞LIMD1和AURKA的表达,运用western Blot技术检测细胞LIMD1和AURKA的蛋白表达水平;（2）设计补救实验（rescue assay）:在干扰内源性LIMD1的表达后,转入外源性LIMD1-c DNA,通过Western Blot技术检测细胞内AURKA蛋白的表达量变化情况。（3）在干扰AURKA的表达或加入AURKA的激酶抑制剂后,通过免疫荧光技术检测LIMD1在细胞内的定位变化情况。（4）在LIMD1过表达与AURKA的激酶抑制剂（MLN8237）联合作用下,通过CCK-8实验技术检测乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖能力的变化情况。研究结果（1）在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中,LIMD1和AURKA之间存在相互作用。（2）在蛋白水平上,干扰LIMD1能促进AURKA的表达,而干扰AURKA对LIMD1的表达没有明显影响。（3）干扰AURKA的表达后,LIMD1在细胞核内定位减少。（4）LIMD1过表达与AURKA抑制剂（MLN8237）联合作用下,乳腺癌细胞系MDA-MB-231的增殖能力明显被抑制。研究结论（1）LIMD1与AURKA之间存在相互作用。（2）靶向LIMD1在蛋白水平上促进AURKA的表达。（3）LIMD1在细胞核内的定位受AURKA的影响。（4）LIMD1过表达与AURKA的激酶抑制剂联合应用可以显著抑制肿瘤细胞的增殖。