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第一部分应用HPLC-ESI-MS/MS建立测定双花百合片中的20种指标成分的方法目的:建立正负离子切换HPLC-MS/MS测定双花百合片中小檗碱、黄连碱、巴马汀、表小檗碱、药根碱、阿魏酸、异阿魏酸、紫堇灵、乙酰紫堇灵、原阿片碱、腺苷、绿原酸、咖啡酸、香草酸、芦丁、荭草苷、异荭草苷、细辛脂素、毛蕊花糖苷、胆酸等20种指标性成分含量的方法,完善其质量控制方法。方法:含量测定方法的建立在MRM正负离子扫描模式下进行,对不同批号的10批双花百合片中的20种指标性成分进行含量测定分析。色谱柱:Agilent ZORBAX Extend-C18 column（100 mm × 2.10 mm,3.5 μm）;流动相 A:乙腈;流动相 B:0.1%甲酸水;采用梯度洗脱的方式:0～3.5 min,14%A;3.5～6.5 min,14%～40%A;6.5～7 min,40%～70%A;7～10 min,70%A;10～13 min,14%A;流速:0.6 mL·min-1;柱温:30℃;进样体积:10μL;分析时间:13 min。结果:20个成分的分离度良好,标准曲线在检测范围内均呈良好线性,r>0.9991。精密度的RSD为0.11%～2.55%,加样回收率平均值为98.7%～102.3%。10批双花百合片含量测定结果显示小檗碱的含量在102～132 mg·g-1,黄连碱在8.36～16.45 mg·g-1,巴马汀在11.1～13.6 mg·g-1,表小檗碱在6.72～10.80 mg·g-1,药根碱在5.96～8.05 m·g-1,绿原酸在3.87～8.81 mg·g-1,阿魏酸在0.171～0.617 mg·g-1,异阿魏酸在0.0188～0.0313 mg·g-1,紫堇灵在0.29～0.861mg·g-1,乙酰紫堇灵在0.012～0.116 mg·g-1,原阿片碱在 0.0873～0.212 mg·g-1,腺苷在 0.34～0.834mg·g-1,咖啡酸在 0.228～0.464 mg·g-1,香草酸在 0.136～0.245 mg·g-1,芦丁在 0.12～0.33 mg·g-1,荭草苷在 0.198～0.356 mg·g-1,异荭草苷在 0.0315～0.0827 mg·g-1,细辛脂素在0.109～0.423 mg·g-1,毛蕊花糖苷在0.0727～0.28 mg·g-1,胆酸在0.037～0.327 mg·g-1。结论:该方法简便,准确,重复性好,可用于双花百合片中多种成分含量的测定和质量控制。第二部分HPLC-ESI-MS/MS法同时测定血浆中5种生物碱成分及大鼠口服黄连和双花百合片后药动学比较目的:建立一种灵敏、快速、高效、专属的HPLC-ESI-MS/MS方法,用于同时测定大鼠口服黄连和双花百合片后5种生物碱成分的血药浓度,并且应用于药代动力学的研究。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,离心取上清,加等量0.1%的甲酸水混匀,应用Agilent ZORBAX Extend-C18 column（100 mm × 2.10 mm,3.5 μm）色谱柱分离,流动相为乙腈-0.1%甲酸水（25:75,v/v）;梯度洗脱:0～2 min,25%A;2.5～3 min,75%A;3～6 min,25%A;流速为0.6 mL/min。离子的检测采用电喷雾离子源（ESI源）,在MRM正离子扫描模式下分析m/z336.0→320.1（小檗碱）,336.0→320.1（表小檗碱）,338.2→322.0（药根碱）,351.9→335.9（巴马汀）,320.0→277.2（黄连碱）,m/z 356.0→192.0（四氢巴马汀,内标）。结果:小檗碱、表小檗碱、黄连碱、药根碱、巴马汀的线性范围为0.2～200 ng/mL,在线性范围内具有良好的线性关系（r>0.995）;所有5种生物碱成分的日内、日间精密度和准确度的RSD值均在0.44%～10.8%和-8.80%～6.83%之间;5种成分的回收率无显著差异,基质效应恒定;通过稳定性的考察,发现样品在室温24h、自动进样2h、3次冷冻-解冻循环稳定以及样品-20℃冷冻30天等条件下存放稳定,检测结果与新配制样品无显著差异。应用该方法测定大鼠口服黄连或双花百合片后5种生物碱的血浆浓度,发现复方给药组5种生物碱的Tmax延后,AUC增加,表明双花百合片中臣佐使等药材可以增加君药黄连中五种生物碱成分的生物利用度。结论:该方法灵敏度高,选择性高,精密度高,节约成本及时间,可用于检测5种生物碱成分的血药浓度和双花百合片的药代动力学研究。