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背景:非酒精性脂肪肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）是一种与饮酒无关,且以肝脏脂肪变性和脂滴堆积为特征的可逆性疾病。由于饮食结构的改变,非酒精性脂肪肝病的发病率逐年升高。据报道,TBP相关因子9（TBP-associated factor 9,TAF9）作为核心启动子复合元件的TFIID（transcription factor IID,TFIID）的一个组成部分,具有直接调节靶基因转录的作用。将其敲除后,果蝇体内的脂滴变大,且其发挥作用的形式是去乙酰化。组蛋白去乙酰化酶1（Histone deacetylases 1,HDAC1）,是HDACs家族成员之一,具有将大多蛋白去除乙酰化的能力。丹参素（Danshensu,DSS）是从丹参根部提取的一种活性成分,具有抑制氧化应激、炎症和纤维化的作用,其可清除自由基并防止硫醇氧化减少脂质过氧化。有报道TAF9作为HDAC1的靶蛋白,其去乙酰化形式被HDAC1直接影响,且HDAC1的表达可被多酚类化合物调控。但在高脂饮食（high fat diet,HFD）所诱导大鼠NAFLD中HDAC1/TAF9信号通路的作用,以及DSS对NAFLD的作用及机制目前尚未见报道。目的:研究HDAC1/TAF9通路在NAFLD中的作用;探讨DSS对NAFLD的保护作用及机制。方法:1.丹参素在NAFLD中的保护作用50只180-220g雄性SD大鼠随机分为下列五组:空白对照组;正常给药组（40mg/kg）;高脂模型组;模型+丹参素低剂量（20mg/kg）组;模型+丹参素高剂量（40mg/kg）组。将大鼠高脂饮食喂养10周,构建NAFLD模型,按分组灌胃给予丹参素。10周后腹主动脉取血,分离肝脏组织标本,于负80冰箱保存。检测大鼠血清中谷丙转氨酶（Alanine Aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（Aspartate Aminotransferase,AST）活性,检测血清中甘油三酯（Triglycerides,TG）、总胆固醇（Total Cholesterol,TC）的含量。肝脏组织标本称重并拍照后,采用HE和油红O染色法检查肝脏病理改变,采用电镜观察肝组织中的脂滴堆积情况,及Western Blotting法检测肝组织TAF9、HDAC1、β-actin、Acetyl-TAF9、CPT1A、ACOX1、PPARa、ACSL1和ADRP蛋白水平。采用q RT-PCR法检测肝组织TAF9、HDAC1、β-actin、CPT1A、ACOX1、PPARa、ACSL1和ADRP的m RNA水平。2.丹参素对PA诱导AML-12细胞损伤的保护作用及其机制研究AML-12细胞分成五组:空白对照组;PA组（0.4m M）;丹参素低、中、高剂量（2.5μM、5μM、10μM）预处理+PA组。丹参素与细胞共同孵育6h后,PA处理24h,后用CCK-8法检测细胞存活率。AML-12细胞分成四组:空白对照组;正常给药组（10μM）;PA组（0.4m M）;丹参素（10μM）+PA组。采用尼罗红染色检测AML-12细胞内脂质堆积的情况。3.探讨TAF9在NAFLD小鼠中的保护作用C57BL/6小鼠40只,随机分为下列四组:空白对照组;慢病毒过表达TAF9组（lentivirus,LV）;高脂模型组;高脂+慢病毒过表达TAF9组。将它们按上述分组,高脂饮食喂养8周造模,造模前尾静脉注射慢病毒过表达TAF9。造模结束后腹主动脉取血,分离肝脏组织标本,于负80冰箱保存。AML-12细胞分成四组:阴性对照组;pc DNA-TAF9组;PA组;PA+LVTAF9组。Western Blotting法检测TAF9、β-actin、CPT1A、ACOX1、PPARa、ACSL1和ADRP蛋白水平。4.体外细胞模型探讨HDAC1/TAF9通路在NAFLD中的作用及丹参素的保护机制AML-12细胞随机分为五组:阴性对照组（si-control）;si-control+PA（0.4m M）组;si-control+PA+DSS（10μM）组;PA+HDAC1 si RNA组;PA+HDAC1 si RNA+DSS（10μM）组。HDAC1 si RNA转染后,DSS给药处理6h后,用PA诱导24h,提取细胞的全蛋白。Western Blotting法检测AML-12细胞TAF9、HDAC1、β-actin、Acetyl-TAF9、CPT1A、ACOX1、PPARa、ACSL1和ADRP的蛋白表达水平;采用免疫共沉淀法检测HDAC1及TAF9蛋白相互作用。AML-12细胞随机分为5组:阴性对照组（pc DNA3.1）;pc DNA3.1+PA组;PA+pc DNA-HDAC1组;PA+pc DNA-HDAC1+si-Control组;PA+pc DNAHDAC1+si-TAF9组。依次转染后,用PA（0.4m M）诱导24h,提取细胞全蛋白,通过Western Blotting法检测细胞内β-actin、CPT1A、ACOX1、PPARa、ACSL1和ADRP的蛋白表达水平。结果:大鼠血清中ALT、AST、TG、TC含量水平因高脂饮食而上升,且肝脏组织明显规格增加,色泽变浅。而丹参素治疗可以明显改善这些现象。在动物和细胞实验中,TAF9特异性过表达后可促进脂肪酸β-氧化功能的激活,并使脂滴堆积情况有所缓解。丹参素明显上调HDAC1和TAF9的表达,促进脂肪酸β-氧化和抑制脂滴堆积。在细胞实验中,HDAC1基因被敲除后,脂肪酸β-氧化的指标蛋白明显下调、脂滴指标蛋白明显上调,同时丹参素对脂肪酸β-氧化和脂滴积聚的调控作用减弱,即丹参素对脂肪酸β-氧化和脂滴的作用至少是通过HDAC1实现的。过表达HDAC1和丹参素治疗起到相似的作用,但干扰TAF9后,过表达HDAC1的效果被部分的减弱,进一步说明TAF9是HDAC1发挥作用关键的下游靶蛋白。上述结果表明,丹参素可以减轻大鼠非酒精性脂肪肝,且这种作用可以通过调控HDAC1/TAF9通路实现。结论:1.丹参素对NAFLD具有明显的防治效果。2.激活TAF9可促进脂肪酸β-氧化,抑制脂滴积聚,进而缓解NAFLD。3.丹参素通过HDAC1/TAF9信号通路减轻NAFLD。