目的:羟基红花黄色素A（HYSA）是从红花中提取分离的活性成份,具有活血化瘀等多种功效。本课题既往研究发现羟基红花黄色素A处理可以抑制固有免疫的激活,改善同系小鼠皮片离体保存后的移植成活质量,基于课题组既往研究,本论文探究羟基红花黄色素A在同系小鼠皮肤移植中抑制固有免疫系统的机理。方法:体外研究:在体外培养Balb/c（H-2d）小鼠朗格罕氏细胞（LC）和脾细胞。将实验分成两部分,3组,A组:Balb/c（H-2d）小鼠朗格罕氏细胞（LC）;B组Balb/c（H-2d）小鼠LC+TLR4激动剂（LPS）/TLR2激动剂（Pam3CSK4）,C组Balb/c（H-2d）小鼠LC+TLR4激动剂（LPS）/TLR2激动剂（Pam3CSK4）+HYSA,培养。用APC-CD207、FITC-CD282 TLR2/TLR4、Percp/Cy5.5-CD40等抗体标记,行流式细胞术检测分析朗格罕氏细胞的数目变化,TLR2、TLR4及CD40分子表达量的变化情况。体内研究:建立同系小鼠躯干皮肤移植模型,将Balb/c（H-2d）雌性小鼠随机分为5组:未行手术组,0h即刻移植组,3h不给药组,3h给药组（HYSA的溶媒是RPMI-1640）,0h同种异体移植组。取供体皮片按实验要求处理后移植到受体背部,术后及随后3天给予3h给药组小鼠腹腔注射HYSA（0.05mg/20g/d,HYSA粉针剂溶于PBS缓冲液中）。在皮片移植术后第三天取实验小鼠及未行手术组双侧淋巴结及脾脏,运用流式细胞术检测分析淋巴结表面CD40分子的表达情况。同时取上述移植模型中小鼠的眼眶血及移植皮片,制备单细胞悬液,ELISA法检测分析IL-6、TNF-α等炎性因子表达情况。结果:体外研究显示:体外培养的LC培养24h后数目高于48h。在LC流式检测实验中,Balb/c（H-2d）小鼠LC+LPS/Pam3CSK4+HYSA组与LC+LPS/Pam3CSK4组相比有明显差异（P<0.05）,与未行手术组相比无差异。检测各组的Toll样受体的表达,均在相对稳定的范围内变化,各组间无明显差异。检测各组的CD40分子的表达,LC+LPS/Pam3CSK4+HYSA组较LC+LPS/Pam3CSK4组显著降低（P<0.05）,与未行手术组相比,未见明显变化。体内研究显示:同系小鼠躯干皮肤移植模型中,3h不给药组淋巴结B细胞表面CD40分子表达量最多,并显著高于3h给药组（P<0.001）。3h给药组与未行手术组,0h即刻移植组相比CD40的表达量均未见明显变化。3h给药组较3h不给药组炎性因子TNF-α的表达量显著降低,IL-6有降低趋势。结论:1.羟基红花黄色素A可以抑制LPS及Pam3CSK4所致的炎症反应;HYSA处理与未处理组的TLRs表达无显著变化;CD40分子的表达被抑制。提示羟基红花黄色素A可能通过TLRs通路的下游在固有免疫的效应阶段发挥抑制作用。2.羟基红花黄色素A处理通过抑制下游炎性因子IL-6、TNF-α的表达,抑制TLRs通路的信号转导,进而改善同系小鼠皮片离体保存后的移植成活质量。