背景:结直肠癌是世界范围内的常见恶性肿瘤之一,在中国,结直肠癌的发病率和死亡率仍在急速增长。在本课题组的前期实验中发现,miR-320a在结直肠癌中具有抑癌作用。SP1是一个转录因子,既往资料证明它在肿瘤相关基因的调控过程中发挥重要作用。SP1在结直肠癌等恶性肿瘤中表达量高,与预后差等临床表现相关,但miR-320a与SP1之间是否存在相关调节尚不明确。目的:从体内和体外验证miR-320a对结直肠癌的抑制作用,明确miR-320a-SP1调控关系,SP1在结直肠癌中的作用。方法:miR-320a过表达稳定细胞细胞株构建,qRT-PCR验证miR-320a过表达水平,通过CCK-8增殖实验、Transwell侵袭实验、细胞克隆形成实验等验证miR-320a的抑癌作用。裸鼠皮下成瘤实验和肝转移模型实验验证miR-320a在体内的抑癌作用。miR-320a过表达细胞中上调SP1表达的功能恢复实验证明被miR-320a抑制的细胞生长、克隆形成和侵袭能力在上调SP1后获得部分恢复,Western blot实验检测miR-320a过表达情况下的SP1蛋白水平变化。SP1与miR-320a之间的关系通过双荧光素酶报告基因实验验证。上调SP1表达的细胞功能获得实验证实SP1是一个促癌基因,而共转染miR-320a的功能挽救实验用以证明miR-320a的抑癌作用。结果:miR-320a过表达稳定株细胞的相关功能实验说明miR-320a能够抑制结直肠癌的生长、转移等能力;裸鼠的体内实验实验发现,miR-320a过表达组的瘤体较NC组明显较小,且肝转移灶的数量也显著低于NC组,说明miR-320a在体内也是发挥抑癌作用的。双荧光素酶报告基因实验、Western blot实验以及SP1功能恢复实验说明miR-320a通过靶向抑制SP1的活性从而发挥抑癌作用。此外本研究发现SP1通过结合miR-320a的启动子来抑制miR-320a的表达发挥促癌作用。相关的功能实验说明miR-320a表达的恢复可以部分抑制因SP1上调而增强的细胞生长、克隆形成和侵袭能力。结论:结直肠癌中存在SP1/miR-320a负反馈环路,这是miR-320a在结直肠癌中表达沉默的原因之一,也可以解释结直肠癌中SP1的表达和活性异常升高的现象。本研究的发现为结直肠癌的未来治疗提供了一个新的方向。