【摘 要】
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以流行性乙型脑炎病毒减弱毒株SA14-14-2的基因组RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增其NS 1基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T载体中,得到克隆质粒pMD18-T-NS1.pMD18-T-NS1经EcoRI和Sa
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以流行性乙型脑炎病毒减弱毒株SA14-14-2的基因组RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增其NS 1基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T载体中,得到克隆质粒pMD18-T-NS1.pMD18-T-NS1经EcoRI和SalI酶切后,回收NS 1片段克隆到原核表达载体pET-28a(+)EcoRI/SalI位点,构建了重组原核表达质粒pET-28a(+)-NS1.转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导获得高效表达,产物经SDS-PAGE电泳结果显示,表达产物分子量约为45kD.Western blottmg分析表明表达产物具有抗原活性.
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