【摘 要】
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目的 探究长链非编码RNA（lncRNA） HOX反义基因间RNA髓系1（HOTAIRM1）调控慢性粒细胞白血病（CML）细胞生长和转移的可能分子机制。方法 qRT-PCR法检测60例CML患者和60例健康体检者的血清HOTAIRM1和miR-17-5p水平。将CML细胞系（K562细胞）作如下分组:（1）对照组（未转染）、siRNA-NC组（转染siRNA-NC）、siRNA-HOTAIRM1组
【基金项目】
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陕西省自然科学基础研究计划项目（2021JM-548）；
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目的 探究长链非编码RNA（lncRNA） HOX反义基因间RNA髓系1（HOTAIRM1）调控慢性粒细胞白血病（CML）细胞生长和转移的可能分子机制。方法 qRT-PCR法检测60例CML患者和60例健康体检者的血清HOTAIRM1和miR-17-5p水平。将CML细胞系（K562细胞）作如下分组:（1）对照组（未转染）、siRNA-NC组（转染siRNA-NC）、siRNA-HOTAIRM1组（转染siRNA-HOTAIRM1）、pcDNA-NC组（转染pcDNA-NC）和pcDNA-HOTAIRM1组（转染pcDNA-HOTAIRM1）;（2）对照组（未转染）、NC-mimic组（转染NC-mimic）、miR-17-5p-mimic组（转染miR-17-5p-mimic）、NC-inhibitor组（转染NC-inhibitor）和miR-17-5p-inhibitor组（转染miR-17-5p-inhibitor）;（3）siRNA-HOTAIRM1+NC-inhibitor组（共转染siRNA-HOTAIRM1和NC-inhibitor）和siRNA-HOTAIRM1+miR-17-5p-inhibitor组（共转染siRNA-HOTAIRM1和miR-17-5p-inhibitor）。细胞不同转染后,通过MTT实验检测细胞增殖,Annexin V/PI双染色实验检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,qRT-PCR检测细胞中HOTAIRM1、miR-17-5p、WNT5A和β-catenin的mRNA水平,Western blot检测细胞中WNT5A和β-catenin的蛋白水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证HOTAIRM1与miR-17-5p、miR-17-5p与WNT5A的靶向关系。结果 与健康体检者相比,CML患者的血清HOTAIRM1水平升高（t=12.253,P ＜0.001）,血清miR-17-5p水平降低（t=15.601,P ＜0.001）。与对照组或siRNA-NC组相比,siRNA-HOTAIRM1组HOTAIRM1相对表达量、WNT5A和β-catenin的mRNA和蛋白相对表达量、细胞活力、迁移和侵袭细胞数量均降低（P＜0.05）,而miR-17-5p相对表达量升高（P＜0.05）。与对照组或pcDNA-NC组相比,pcDNAHOTAIRM1组HOTAIRM1相对表达量、WNT5A和β-catenin的mRNA和蛋白相对表达量、细胞活力、迁移和侵袭细胞数量均升高（P＜0.05）,而miR-17-5p相对表达量降低（P＜0.05）。HOTAIRM1靶向抑制miR-17-5p,miR-17-5p靶向抑制WNT5A（P＜0.05）。与对照组或NC-mimic组相比,miR-17-5p-mimic组miR-17-5p相对表达量升高,WNT5A和β-catenin的mRNA和蛋白相对表达量降低,细胞活力降低,迁移和侵袭细胞数量降低（均P ＜0.05）。与对照组或NC-inhibitor组相比,miR-17-5pinhibitor组miR-17-5p相对表达量降低,WNT5A和β-catenin的mRNA和蛋白相对表达量升高,相对细胞活力、迁移和侵袭细胞数量升高（均P＜0.05）。与si-HOTAIRM1+NC-inhibitor组相比,si-HOTAIRM1+miR-17-5p-inhibitor组相对细胞活力、迁移和侵袭细胞数量、WNT5A和β-catenin的mRNA和蛋白相对表达量升高（均P＜0.05）。结论 HOTAIRM1可能通过miR-17-5p/WNT5A/β-catenin信号通路来调节CML细胞的生长和转移。
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