LncRNA MEG3对脑胶质瘤细胞替莫唑胺获得性耐药的影响

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ZHANGXIANYU0000
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目的 探讨长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)对胶质瘤细胞替莫唑胺(TMZ)获得性耐药的影响。方法 构建TMZ耐药胶质瘤细胞U87(U87/TMZ),qRT-PCR法检测LncRNA MEG3表达水平,MTT法检测细胞增殖能力。用脂质体法使U87/TMZ细胞中LncRNA MEG3过表达(pcDNA-MEG3组),转染空载体作为空载体组(pcDNA组),同时以常规培养的U87/TMZ细胞作为空白组(Control组),并用10μg/ml TMZ处理。采用qRT-PCR评估质粒转染效果;Western blot法检测LncRNA MEG3相关蛋白表达;细胞克隆实验检测LncRNA MEG3对细胞增殖的影响;Transwell实验检测LncRNA MEG3对细胞侵袭的影响;流式细胞术检测LncRNA MEG3对细胞凋亡的影响,并构建小鼠移植瘤动物模型进行体内实验。结果 U87/TMZ细胞中LncRNA MEG3表达水平低于U87(P<0.01),并且U87/TMZ的细胞活力高于U87(P<0.01)。过表达LncRNA MEG3联合TMZ后,与Control组和pcDNA组比较,pcDNA-MEG3组上调了LncRNA MEG3 mRNA及p53蛋白表达,下调了MDM2蛋白表达,且pcDNA-MEG3组增殖和侵袭能力降低,凋亡能力增加(P<0.01)。构建小鼠移植瘤动物模型,与pcDNA组相比,pcDNA-MEG3组肿瘤体积和质量降低(P<0.01)。结论 过表达LncRNA MEG3能减弱TMZ耐药胶质瘤细胞的耐药性。
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