目的探究LncRNA RP4-758J24.5-S在脑胶质瘤细胞和脑胶质瘤干细胞(GSCs)中的功能与机制方法1、采用无血清饥饿培养法富集U87和U251肿瘤干细胞2、通过查找文献,获得一些在脑胶质瘤的癌组织和癌旁组织存在表达量差异的LncRN As,运用PCR和QPCR验证这些LncRNAs在U87与U87干细胞,U251与U251干细胞中的表达量差异,获得表达量差异比较明显的LncRNAs,筛选出用于本课题研究的L ncRNA RP4-758J24.5-S。3、在体外设计用于沉默LncRNA RP4-758J24.5-S的SiRNA,采用瞬时转染检测下调L ncRNA RP4-758J24.5-S后对U87和U251体外增殖的影响。4、构建LncRNA RP4-758J24.5-S低表达的慢病毒稳定细胞株。5、采用CCK8、平板克隆形成实验、细胞划痕实验、transwell、Annexin V-FITC/PI双染、PI染色检测LncRNA RP4-758J24.5-S低表达的慢病毒稳定细胞株增殖能力、克隆形成能力、迁移能力、细胞周期以及细胞凋亡情况的变化。6、采用QPCR、干细胞成球实验检测LncRNA RP4-758J24.5-S低表达的U87和U251干细胞稳定细胞株干性、自我更新能力、成球能力的变化。结果1、本课题采用无血清饥饿诱导培养法成功从脑胶质瘤细胞(U87和U251)中分离出脑胶质瘤干细胞(GSCs,U87GSCs和U251GSCs)。2、PCR和QPCR结果均显示LncRNA RP4-758J24.5-S在U87s和U251s中表达量高于在U87和U251细胞中的表达。3、构建LncRNA RP4-758J24.5-S低表达的慢病毒稳转细胞株,下调LncRNA RP4-758J24.5-S能够有效的降低U87和U251的细胞增殖能力,克隆形成能力,并且明显地改变了细胞周期,促进凋亡。4、下调LncRNA RP4-758J24.5-S对U87和U251的迁移能力可能无影响。5、在GSCs细胞中下调LncRNA RP4-758J24.5-S的表达量后,肿瘤干细胞球直径变小、肿瘤干细胞球形成率降低,细胞干性维持相关分子标志表达量下调。结论降低LncRNA RP4-758J24.5-S表达量能够明显降低U87和U251的增殖能力、克隆形成能力,明显影响细胞周期,造成U87和U251细胞G2/M期阻滞,并且促进细胞凋亡,但是对于U87和U251的细胞迁移能力并无太大影响。低表达LncRNA RP4-758J24.5-S能够抑制GSCs的增殖、干细胞成球以及自我更新能力,并降低GSCs的干性。