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目的
探讨脐带间充质干细胞（ucMSC）外泌体对急性皮肤创面愈合的影响。
方法用超高速离心法提取ucMSC外泌体，经透射电镜观察、Western印迹检测外泌体表面标志物CD63和TSG101和粒径分析鉴定外泌体。体外培养3~5代人皮肤成纤维细胞（HSF），分别用含0（阴性对照组）、1、2 μg/ml外泌体的高糖DMEM培养基孵育24 h（分别为1、2 μg/ml组），CCK8法检测ucMSC外泌体对HSF增殖活力的影响。取24只8周龄雄性BALB/c小鼠构建全层皮肤损伤小鼠模型，按随机数字表等分为ucMSC外泌体组和磷酸盐缓冲液（PBS）组，距创缘约1 mm处等距皮下多点注射ucMSC外泌体悬液或PBS。术后第0、4、7、10、14天观察两组小鼠创面并计算创面残余面积百分比，术后第7、14天取创面组织后行HE和Masson染色，观察皮肤组织结构变化。术后第14天收集两组小鼠创面皮肤组织，实时定量PCR和Western印迹检测Ⅰ型胶原蛋白、纤连蛋白、血管内皮生长因子mRNA和蛋白的表达水平。统计分析采用单因素方差分析、LSD-t检验、双因素重复测量方差分析及非配对t检验。
结果透射电镜下，ucMSC外泌体呈椭圆形，直径约100 nm；Western印迹检测显示，ucMSC外泌体表面蛋白CD63、TSG101表达阳性；粒径分析显示，96.2% ucMSC外泌体直径30 ~ 150 nm。CCK8法检测显示，外泌体1 μg/ml组和2 μg/ml组HSF相对活力（0.97 ± 0.05、1.08 ± 0.07）均显著高于阴性对照组（0.71 ± 0.04），t值分别为2.00、7.05，均P