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探讨环孢素(CsA)与胆酸减轻受α-鹅膏毒肽(α-AMA)攻击人肝细胞损伤的作用及机制。
方法根据本课题前期研究确定的人肝细胞生存的最小α-AMA攻击质量浓度(1.4 g/L)将实验分为5组：空白对照组、损伤组、甘氨鹅脱氧胆酸组、CsA组、CsA联合胆酸组(CsA＋牛磺胆酸、CsA＋鹅脱氧胆酸、CsA＋甘氨胆酸、CsA＋甘氨鹅脱氧胆酸和CsA＋牛磺鹅脱氧胆酸)，每个组均设立3个时间点：攻击24 h、48 h和72 h，在攻击24 h后采用CsA、甘氨鹅脱氧胆酸和CsA联合胆酸保护损伤肝细胞，在倒置相差显微镜下观察细胞的形态学改变， 使用3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法进行活细胞计数，生化法检测培养上清液中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。
结果与空白对照组比较，损伤组肝细胞生长明显受到抑制，细胞进行性凋亡，MTT法吸光度值明显下降(0.345±0.021)；AST、ALT活性逐渐升高，最高值在损伤72 h[分别为(98.4±6.7) U/L和(116.2±9.5) U/L]。与损伤组比较，甘氨鹅脱氧胆酸组、CsA组和CsA联合胆酸组破碎细胞器明显减少，吸光度值增高，且CsA＋鹅脱氧胆酸组在各时间点吸光度值最高(0.656±0.014)(P<0.05)；同时AST、ALT升高不明显，CsA＋鹅脱氧胆酸组在各时间点数值最低[(22.3±6.2) U/L和 (20.2±5.4) U/L，P<0.05]。
结论CsA与胆酸一样对α-AMA攻击人肝细胞有保护作用，作用机制是CsA作为有机阴离子转运多肽(OATP1B1和OATP1B3)的抑制剂抑制α-AMA的吸收。CsA＋鹅脱氧胆酸的联合应用优于单一使用OATP的底物或抑制剂。